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yanhuazh2008金蟲 (小有名氣)
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real time PCR 溶解曲線 目的產(chǎn)物后又出一個(gè)峰 怎么回事
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real time PCR 溶解曲線 目的產(chǎn)物后又出一個(gè)峰 之前做了幾次都沒出現(xiàn)過 到底是社么 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 很熱心的回復(fù)，熱心的蟲蟲 2012-07-06 13:42:06
yanhuazh2008: 金幣+8, ★★★很有幫助 2012-07-09 09:54:57
小丹木木: 金幣+3, MolEPI+1, 很熱心的回復(fù)，熱心的蟲蟲 2012-07-06 13:42:06
yanhuazh2008: 金幣+8, ★★★很有幫助 2012-07-09 09:54:57
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出現(xiàn)了其他的峰造成的原因肯定是產(chǎn)物不純，但是我想分幾個(gè)方面還做分析： 1.環(huán)境污染或者說人為操作的污染，這方面的因素我想可以第一個(gè)來排除，因?yàn)槟阒白龅臉悠窙]有其他的峰，要是前后都是在一個(gè)地方做實(shí)驗(yàn)的話應(yīng)該不會(huì)出現(xiàn)環(huán)境污染，另外因?yàn)閮纱谓Y(jié)果的都有雜峰出現(xiàn)，所以人為因素也不是很有可能。 2.引物的污染或者樣品的污染。我覺得這兩者的污染的可能性是很大的，但是換一種思路來想的話，要單單是樣品污染的話應(yīng)該不會(huì)只擴(kuò)出來一個(gè)雜峰，所以我想可能是因?yàn)橐锏奈廴?br /> 3.退火溫度稍低而導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增。這一點(diǎn)的話因?yàn)槟阒皵U(kuò)的沒有問題，這一點(diǎn)可能不會(huì)產(chǎn)生影響，但是也不能排除儀器的前后誤差。 希望我的解釋可以幫助到你~ |
5樓2012-07-05 21:21:27
yuzhiming
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6樓2012-07-06 09:45:43
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