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anoldhorse鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助，換了高保真酶擴(kuò)不出來(lái)目的條帶
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| 我的目的產(chǎn)物是3600bp，原來(lái)用takara的LA HS可以擴(kuò)出來(lái)，換了東洋紡的KOD Plus Neo怎么也擴(kuò)不出來(lái)，求高手指點(diǎn) |
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Marado
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【答案】應(yīng)助回帖
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amisking: 金幣+3, MolEPI+1, 鼓勵(lì)發(fā)帖交流！ 2012-07-01 17:47:27
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延伸時(shí)間要延長(zhǎng)，你這兩種酶我都沒(méi)用過(guò)，但是一般情況下Taq之類(lèi)的不保證酶1min最少可以延伸1000bp，pfu等高保真酶只有500~600bp，所以PCR條件也要相應(yīng)的改變： 如果目的產(chǎn)物3600bp 用普通Taq酶延伸時(shí)間至少需要4min左右 用pfu高保真則需要8min左右 希望可以幫到你，祝樓主好運(yùn).  |
2樓2012-07-01 15:24:48
Marado
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10樓2012-07-02 09:03:53
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