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anoldhorse鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助,換了高保真酶擴(kuò)不出來(lái)目的條帶
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| 我的目的產(chǎn)物是3600bp,原來(lái)用takara的LA HS可以擴(kuò)出來(lái),換了東洋紡的KOD Plus Neo怎么也擴(kuò)不出來(lái),求高手指點(diǎn) |
【分子生物】EPI帖 |
金蟲(chóng) (小有名氣)
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
Dreamer
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延伸時(shí)間要延長(zhǎng),你這兩種酶我都沒(méi)用過(guò),但是一般情況下Taq之類的不保證酶1min最少可以延伸1000bp,pfu等高保真酶只有500~600bp,所以PCR條件也要相應(yīng)的改變: 如果目的產(chǎn)物3600bp 用普通Taq酶延伸時(shí)間至少需要4min左右 用pfu高保真則需要8min左右 希望可以幫到你,祝樓主好運(yùn). |

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
Dreamer

鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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