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[求助]
大鼠DRG培養(yǎng)出來(lái)的細(xì)胞，大家?guī)臀铱纯词鞘裁醇?xì)胞�。�？？ 已有1人參與
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DRG培養(yǎng)神經(jīng)元，Ara-C連續(xù)殺3d后，還是有這些細(xì)胞，大家?guī)臀铱纯炊际鞘裁醇?xì)胞��？？？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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silicare: 金幣+3, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 有成纖維嗎 2012-07-11 09:18:54
yqbter: 金幣+2, 鼓勵(lì)發(fā)帖！ 2012-07-11 10:18:13
silicare: 金幣+3, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 有成纖維嗎 2012-07-11 09:18:54
yqbter: 金幣+2, 鼓勵(lì)發(fā)帖！ 2012-07-11 10:18:13
| 看起來(lái)有雪旺細(xì)胞還有成纖維細(xì)胞，Ara-C的功能是殺死增殖的細(xì)胞，但效果并不是說(shuō)殺了就一定沒(méi)有，神經(jīng)元本身也分泌一些物質(zhì)促進(jìn)周圍細(xì)胞的生長(zhǎng)，你的DRG用什么培養(yǎng)基養(yǎng)的？ |
2樓2012-07-11 09:14:51
3樓2012-07-14 00:53:50
4樓2012-07-14 14:16:04
lilei4283
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6樓2013-07-02 18:58:13
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【答案】應(yīng)助回帖
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前輩，我是用的neurobasal-A+B27(1:50)+(40ng/ml)β-NGF+L-Glutamine(0.5mmol/l)培養(yǎng)基培養(yǎng)，可三天了，沒(méi)見(jiàn)到什么細(xì)胞，不知道哪里出錯(cuò)了，請(qǐng)前輩幫我看看。 1.在體式顯微鏡下取下DRG放入冰的PBS液里面 2.將其用PBS洗滌三次，再用眼科剪剪碎 3.剪碎后移入15ml離心管中，加入0.25%的胰酶和0.2%的IV型膠原酶，37°C孵育30min，并吹打兩次 4.加入冰的PBS終止反應(yīng)，離心 1000rpmX5min ，棄上清 5.加入上述培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，鋪入PLL包被的25mm2的培養(yǎng)瓶 6.培養(yǎng)3天了 沒(méi)有見(jiàn)到什么梭形或者三角形的神經(jīng)元 請(qǐng)前輩指導(dǎo)啊，抓狂 |
7樓2014-08-17 21:06:19
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