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20104226034銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
CYP3A5大腸桿菌表達(dá) 沒(méi)有目的蛋白？
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各位高手能否給予指教！ 表達(dá)載體：PCW 宿主細(xì)菌：DH5α 細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)夜后1:100轉(zhuǎn)移至含有100ug/ml的氨芐抗性的LB培養(yǎng)基中，37度培養(yǎng)3h至OD600為0.6，加入IPTG終濃度為1mM , 25度培養(yǎng)20h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)沒(méi)有目的蛋白，不知是什么原因？文獻(xiàn)中報(bào)道要在培養(yǎng)體系中加(0.5 mM 5-aminolevulinic acid, trace salts, and 1 mM thiamine），不知這些東西是否一定要加，各有什么作用呢？ |
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燕子9883
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2樓2012-07-11 22:53:59
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3樓2012-07-11 22:54:48
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4樓2012-07-12 20:45:30
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6樓2014-02-23 12:04:28
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