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20104226034銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
CYP3A5大腸桿菌表達 沒有目的蛋白？
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各位高手能否給予指教！ 表達載體：PCW 宿主細菌：DH5α 細菌培養(yǎng)過夜后1:100轉(zhuǎn)移至含有100ug/ml的氨芐抗性的LB培養(yǎng)基中，37度培養(yǎng)3h至OD600為0.6，加入IPTG終濃度為1mM , 25度培養(yǎng)20h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)沒有目的蛋白，不知是什么原因？文獻中報道要在培養(yǎng)體系中加(0.5 mM 5-aminolevulinic acid, trace salts, and 1 mM thiamine），不知這些東西是否一定要加，各有什么作用呢？ |
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20104226034
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2012-07-11 22:54:48
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5樓2012-10-21 10:44:43
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