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zhangzhen028新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
微生物降解多環(huán)芳烴實(shí)驗(yàn)中的詭異現(xiàn)象 已有1人參與
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| 本人最近在做微生物降解多環(huán)芳烴熒蒽的實(shí)驗(yàn)，菌是自己之前在污染土壤里篩的，把菌加到以熒蒽為唯一碳源的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中，以滅活菌為對(duì)照，培養(yǎng)七天后用乙酸乙酯萃取，再用甲醇定容做液相測(cè)剩余熒蒽濃度。實(shí)驗(yàn)做過(guò)好幾次了，每次測(cè)的結(jié)果都是滅活菌組的剩余濃度小于活菌組的，求各種大神或者做過(guò)類(lèi)似實(shí)驗(yàn)有過(guò)類(lèi)似經(jīng)驗(yàn)的大神們幫幫小弟這個(gè)忙，不甚感激�。�！ |
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reallpf
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhang8826857: 金幣+1, MicEPI+1, good ，很不多，值得一個(gè)epi，多來(lái)幫助其他中的哦^_^有專(zhuān)家的潛質(zhì)^_^ 2012-07-15 16:12:21
zhang8826857: 金幣+5, 另外，鼓勵(lì)鼓勵(lì)新蟲(chóng)，加油哦 2012-07-15 16:12:40
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贊同2樓的觀(guān)點(diǎn)，但是你的菌都是培養(yǎng)7d，所以這種可能性會(huì)減少。另外我認(rèn)為你應(yīng)該加一個(gè)對(duì)照，就是不加菌的培養(yǎng)基同實(shí)驗(yàn)組一樣過(guò)程走完再進(jìn)液相分析。 個(gè)人觀(guān)點(diǎn)認(rèn)為： 1.首先要確定你活菌實(shí)驗(yàn)組的菌是否有生長(zhǎng)，以及滅活菌對(duì)照組的菌是否沒(méi)有生長(zhǎng)。 2.活菌實(shí)驗(yàn)組的菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)是否與你之前篩的菌的生長(zhǎng)曲線(xiàn)大體一致。 3.萃取過(guò)程中能否保證實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的效率一致。 4.這點(diǎn)可能性非常小，但在我的實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)過(guò)，就是你配得培養(yǎng)基是否完全混溶好了再分裝的。 個(gè)人建議： 1.添加一個(gè)我所說(shuō)的空白對(duì)照。 2.完善萃取環(huán)節(jié)。 3.確定你目前所用的菌是否與之前篩的菌一樣，可以從生長(zhǎng)曲線(xiàn)入手。這點(diǎn)也可以排除由于菌的生長(zhǎng)狀況帶來(lái)的你所說(shuō)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 另外請(qǐng)教你一個(gè)問(wèn)題，用乙酸乙酯萃取后為什么用甲醇定容呢？ |
3樓2012-07-15 14:00:01
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9樓2012-09-20 15:53:25
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2樓2012-07-15 11:17:06
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4樓2012-07-15 14:01:24
zhangzhen028
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謝謝你的建議~你說(shuō)的空白對(duì)照我也做了，空白組沒(méi)有問(wèn)題，你說(shuō)的生長(zhǎng)曲線(xiàn)我倒是想嘗試一下在不同時(shí)間段測(cè)一下OD600，看看菌的生長(zhǎng)情況。至于你說(shuō)的萃取過(guò)程效率一致這應(yīng)該不能保證吧，這種實(shí)驗(yàn)肯定是有小誤差的，但都出現(xiàn)我說(shuō)的情況應(yīng)該不會(huì)是效率的問(wèn)題吧，還有培養(yǎng)基配好之后我都超聲了很久才開(kāi)始分裝的，應(yīng)該也不會(huì)有太大問(wèn)題。最后，用甲醇定容是我們這邊的液相流動(dòng)相是甲醇。 |
5樓2012-07-16 09:48:53
zhangzhen028
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6樓2012-07-16 09:51:20
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7樓2012-07-16 10:33:04
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8樓2012-07-18 12:11:28
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