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[求助]
請(qǐng)幫忙分析一下提取RNA遇到的問(wèn)題
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我實(shí)驗(yàn)室的Trizol提取RNA，氯仿分層以后，提取上清液，加入異丙醇時(shí)，出現(xiàn)大量渾濁懸浮白色沉淀，而且離心后發(fā)現(xiàn)管底有一大坨白色物質(zhì)，量很大，應(yīng)該不是RNA那種透明的膠狀沉淀。這個(gè)沉淀很難溶解，我加了500微升的水才完全溶解。 我以前提的效果很好，不知道這幾次到底是什么原因？請(qǐng)幫忙分析一下！ 另外，我又買promega試劑盒Z3100，提取RNA，效果也不是很好，我的下游主要是做PCR。 我以前提的效果很好，不知道這幾次到底是什么原因？請(qǐng)幫忙分析一下！ 電泳圖見(jiàn)附件，第2，3泳道是用Trizol提的，4，5泳道是用試劑盒提的！ 如果做PCR的話，后兩個(gè)泳道的RNA可以用嗎？可以直接進(jìn)行一步法PCR嗎？ 謝謝！ |
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 【分子生物】EPI帖 |
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3樓2012-07-16 19:56:31
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1.2兩個(gè)是降解了，小分子量的地方很亮 3,4你可以試試，至少?zèng)]怎么降解。 你說(shuō)原來(lái)提的好，是一樣的材料嗎？不同的材料需要用不同的提取方法。 我以前提植物根，用trizol，結(jié)果最后出來(lái)很多難溶的白色沉淀，我用低速離心把白色弄成沉淀，吸取上清跑RNA也是能跑出來(lái)可以用的條帶，一般來(lái)說(shuō)是蛋白污染。 |
2樓2012-07-16 19:39:51
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5樓2012-07-16 20:04:32
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