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[求助]
幫忙看下這兩個引物有沒有問題
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正向引物 5-3：CCGAATTCATGAAAAAGATTTGGCTGGCGCTGGCTGG Tm=71.74° GC含量為51% 反向引物 5-3：GTAATCAAGCTTAATGATGATGATGATGATGTAGAAAACTTTGTATCCACTCTGTGAACCTTGGCACC Tm=73.94° GC含量為38% 哪位大俠幫忙看看這兩個引物有沒有問題啊，這是我重疊延伸PCR中第二輪PCR的上下游引物，第一輪PCR的A,B片段都P出來了，但是第二輪就是P不出來，退火溫度嘗試了50°，55°，以及touch down都P不出來，核酸電泳時都在100bp及250bp有很亮的條帶。 |
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生物大蟲
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3樓2012-07-24 11:51:23
sd3824289
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2樓2012-07-24 10:47:58
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5樓2012-07-24 15:24:29
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