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獨(dú)立寒秋木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
HPLC 求教！
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| 各位高手 我在做一個(gè)糖脂，糖脂極易溶于在二氯甲烷中，在甲醇中溶解度很小，用HPLC分析 用的是C18的反相柱，分析型， 流動(dòng)相用的的乙腈 水（均含有0.1%的乙酸）梯度洗脫 具體如下�。洪_(kāi)始50%乙腈+50%水 30分鐘后100%乙腈+0%水 30-40分鐘100%乙腈 50分鐘后再回到50%乙腈+50%水。由于我的樣品很容易溶解在二氯甲烷中，開(kāi)始用二氯甲烷進(jìn)樣10 -20Ul 結(jié)果發(fā)現(xiàn)跑的很難看，并且前幾分鐘就出現(xiàn)很難看 并且吸光度很高的鬼峰，（分析可能是二氯甲烷和乙腈水體系不互溶，導(dǎo)致鬼峰）后來(lái)用甲醇溶解，上樣就沒(méi)問(wèn)題，但是問(wèn)題是樣品在甲醇中溶解度很小，峰很小，效果不好，(增大進(jìn)樣量到140ul，效果也不是很好，峰很�。┪椰F(xiàn)在想讓高手幫忙，幫我選一個(gè)溶劑，能與乙腈水體系互溶，同時(shí)對(duì)我的樣品溶解度很好，請(qǐng)大家?guī)兔Γ粍俑屑�。定重謝！ |
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2樓2012-07-22 22:53:18
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首先試一下起始流動(dòng)相比例（不加緩沖鹽）對(duì)樣品的溶解度好不好？ 如果還不能溶解再試一下純乙腈；還不行就用甲醇：二氯甲烷=1:1溶解性肯定沒(méi)問(wèn)題了，而且和流動(dòng)相互溶 但要關(guān)注：當(dāng)用純?nèi)軇簭?qiáng)度大于流動(dòng)相起始比例的溶劑時(shí)就有可能發(fā)生溶劑效應(yīng)。原因就是柱頭擴(kuò)散，離子狀態(tài)等因素 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
3樓2012-07-23 07:26:49
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4樓2012-07-23 08:40:32
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5樓2012-07-23 11:16:07
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6樓2012-07-23 13:59:05
7樓2012-07-23 14:32:25
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8樓2012-07-23 14:40:13
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9樓2012-07-23 17:00:08
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10樓2012-07-25 18:34:48
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