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獨(dú)立寒秋木蟲 (正式寫手)
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[求助]
HPLC 求教!
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| 各位高手 我在做一個(gè)糖脂,糖脂極易溶于在二氯甲烷中,在甲醇中溶解度很小,用HPLC分析 用的是C18的反相柱,分析型, 流動相用的的乙腈 水(均含有0.1%的乙酸)梯度洗脫 具體如下。洪_始50%乙腈+50%水 30分鐘后100%乙腈+0%水 30-40分鐘100%乙腈 50分鐘后再回到50%乙腈+50%水。由于我的樣品很容易溶解在二氯甲烷中,開始用二氯甲烷進(jìn)樣10 -20Ul 結(jié)果發(fā)現(xiàn)跑的很難看,并且前幾分鐘就出現(xiàn)很難看 并且吸光度很高的鬼峰,(分析可能是二氯甲烷和乙腈水體系不互溶,導(dǎo)致鬼峰)后來用甲醇溶解,上樣就沒問題,但是問題是樣品在甲醇中溶解度很小,峰很小,效果不好,(增大進(jìn)樣量到140ul,效果也不是很好,峰很。┪椰F(xiàn)在想讓高手幫忙,幫我選一個(gè)溶劑,能與乙腈水體系互溶,同時(shí)對我的樣品溶解度很好,請大家?guī)兔,不勝感激。定重謝! |
至尊木蟲 (著名寫手)

金蟲 (小有名氣)
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首先試一下起始流動相比例(不加緩沖鹽)對樣品的溶解度好不好? 如果還不能溶解再試一下純乙腈;還不行就用甲醇:二氯甲烷=1:1溶解性肯定沒問題了,而且和流動相互溶 但要關(guān)注:當(dāng)用純?nèi)軇簭?qiáng)度大于流動相起始比例的溶劑時(shí)就有可能發(fā)生溶劑效應(yīng)。原因就是柱頭擴(kuò)散,離子狀態(tài)等因素 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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木蟲 (正式寫手)
鐵桿木蟲 (著名寫手)


木蟲 (正式寫手)
鐵桿木蟲 (著名寫手)

銀蟲 (小有名氣)
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