 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (4493)
- >導(dǎo)師招生 (742)
- >考研 (557)
- >文獻(xiàn)求助 (282)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (194)
- >休閑灌水 (142)
- >考博 (139)
- >基金申請(qǐng) (116)
- >碩博家園 (82)
- >招聘信息布告欄 (80)
- >博后之家 (57)
- >綠色求助(高懸賞) (33)
- >論文投稿 (27)
- >找工作 (21)
- >SciFinder/Reaxys (18)
- >外文書(shū)籍求助 (12)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1497 | 回復(fù): 8 | ||
[求助]
平端 影響連接嗎
|
||
| 本人原核表達(dá)載體構(gòu)建總是連接不上，會(huì)不會(huì)是因?yàn)槊盖形稽c(diǎn)EcoR V的斷口是平末端？？？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有115人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
3樓2012-07-25 16:12:24
scutphoenix
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 2294.6
- 散金: 150
- 紅花: 1
- 帖子: 520
- 在線: 53.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 348663
- 注冊(cè): 2007-04-18
- 專業(yè): 病毒學(xué)
2樓2012-07-25 15:08:47
4樓2012-07-25 17:24:35
5樓2012-07-25 18:20:32
酶切專家
金蟲(chóng) (小有名氣)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 96 (初中生)
- 金幣: 1610.8
- 紅花: 4
- 帖子: 149
- 在線: 41.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1648414
- 注冊(cè): 2012-02-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-07-26 15:21:17
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-07-26 15:21:17
|
一般來(lái)說(shuō)，克隆不成功的原因是載體或外援片段處理不好。常見(jiàn)的情況有兩種： 1. 質(zhì)粒DNA的質(zhì)量不好，導(dǎo)致載體處理不完全（大量的單切或未酶切載體），連接時(shí)出現(xiàn)大量的載體自連，形成大量的背景克隆 2.外源基因片段酶切不好，導(dǎo)致外源基因片段無(wú)法連入載體。常見(jiàn)的錯(cuò)誤是總擔(dān)心PCR片段不夠，酶切時(shí)PCR產(chǎn)物用量太多。事實(shí)上，一般由于PCR產(chǎn)物分子量小，完全酶切PCR產(chǎn)物需要的酶量將切同樣量的載體DNA所需的酶量多得多。一般來(lái)說(shuō)，PCR產(chǎn)物酶切時(shí)，用300--500ng的DNA就足夠用了。 關(guān)于雙酶切設(shè)計(jì)的問(wèn)題，可以利用一個(gè)在線的雙酶切軟件double digestion disigner ，我以前在小木蟲(chóng)推薦過(guò)，當(dāng)時(shí)免費(fèi)，現(xiàn)在可能收費(fèi)了，但仍然可以申請(qǐng)免費(fèi)使用。 利用該軟件進(jìn)行酶量的精確計(jì)算，不用擔(dān)心酶量是否足夠的問(wèn)題。 |
6樓2012-07-25 20:54:46
7樓2012-07-25 21:46:26
scutphoenix
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 2294.6
- 散金: 150
- 紅花: 1
- 帖子: 520
- 在線: 53.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 348663
- 注冊(cè): 2007-04-18
- 專業(yè): 病毒學(xué)
8樓2012-07-26 22:11:16
lixilei1314
金蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 1279.9
- 散金: 905
- 紅花: 1
- 帖子: 214
- 在線: 117.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1276794
- 注冊(cè): 2011-04-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 水產(chǎn)生物遺傳育種學(xué)
9樓2012-08-27 08:53:26
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 芥末貓 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +3 | YNRYG 2026-03-21 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑 +7 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長(zhǎng)期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 墨墨漠 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 一志愿東華大學(xué)控制學(xué)碩320求調(diào)劑
+3
|
Grand777 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 勇敢的小吳 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | shxchem 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級(jí)已過(guò) 本科山東雙非 求調(diào)劑！ +3 | 不想理你 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑 +12 | yangfz 2026-03-17 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +4 | llllkkkhh 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，求調(diào)劑 +5 | 材化逐夢(mèng)人 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩297已過(guò)四六級(jí)求調(diào)劑推薦 +11 | adaie 2026-03-19 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 353求調(diào)劑 +3 | 拉鉤不許變 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿南理工085701環(huán)境302求調(diào)劑院校 +3 | 葵梓衛(wèi)隊(duì) 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國(guó)海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑招人�。。� +3 | 山海天嵐 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿福大288有機(jī)化學(xué)，求調(diào)劑 +3 | 小木蟲(chóng)200408204 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 26博士申請(qǐng) +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|