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cpuyao木蟲 (小有名氣)
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[求助]
大鼠心肌梗死區(qū)和非梗死區(qū)凍存后如何區(qū)分？？？
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請教各位蟲友一個問題：藥物預(yù)防大鼠心肌梗死實驗，模型是結(jié)扎左前降支，動物實驗結(jié)束后，大鼠完整心臟直接凍在-80°冰箱了，沒有分離梗死區(qū)和非梗死區(qū)。現(xiàn)在下一步要做蛋白質(zhì)組學(xué)，整個完整心臟勻漿不太現(xiàn)實，因為梗死區(qū)面積相對于非梗死區(qū)要少很多，可能關(guān)鍵蛋白信號會淹沒，看文獻(xiàn)說要提前分開梗死區(qū)組織的，我們什么都沒有分離，取完整個心臟就凍在冰箱里了，解凍估計也看不清了吧？要怎么辦才好呢，希望有知道的蟲友提提寶貴意見~多謝了�。�！ 1. 肉眼上怎么剝離梗死區(qū)，尤其是冰凍后的組織，有人說用激光顯微切割，有的說肉眼可觀察。。。。。解凍了分離對結(jié)果有很大影響吧？ 2.有做過心梗蛋白質(zhì)組學(xué)的嘛？一般是取得哪部分組織提取蛋白的？對照用的什么？ 3.是誰不是右心室直接扔掉不用了？ 4.沒有用液氮速凍再轉(zhuǎn)存-80°，是不是對組織有影響呢？ 問題較多，希望大家隨便說，我廣泛接受意見~謝謝，謝謝啦~ |
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cpuyao
木蟲 (小有名氣)
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lele_go
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cpuyao: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝，染色后的組織貌似不能做蛋白質(zhì)組了吧。。。。 2012-09-20 16:56:19
cpuyao: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝，染色后的組織貌似不能做蛋白質(zhì)組了吧。。。。 2012-09-20 16:56:19
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1、應(yīng)該是要染色進(jìn)行區(qū)分的，根據(jù)梗死區(qū)和非梗死區(qū)的顏色不同進(jìn)行區(qū)分。 2、做蛋白組學(xué)的時候用的是左心室的組織，對照組（取決于你的實驗安排），一般是假手術(shù)組，就是只是進(jìn)行開胸但是不接扎的組。當(dāng)然也可以直接用正常的心臟。 3、右心室要看你的實驗需求，要是進(jìn)行切片觀察的話，還是建議你保留下來，畢竟完整的心臟的圖片才有說服力。 4、如果是做分子生物學(xué)方面的實驗，我們一般是直接放到液氮里保存，但是如果是做病例切片染色的話，還要用氯化鉀來處理一下，保持心臟維持在舒張的狀態(tài)，這樣切片會比較好看！ 都是自己的一點經(jīng)驗，希望能對你有所幫助！ |
4樓2012-09-20 13:50:51
lele_go
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5樓2012-09-20 22:12:53
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