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cpuyao木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
大鼠心肌梗死區(qū)和非梗死區(qū)凍存后如何區(qū)分？？？
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請(qǐng)教各位蟲(chóng)友一個(gè)問(wèn)題：藥物預(yù)防大鼠心肌梗死實(shí)驗(yàn)，模型是結(jié)扎左前降支，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，大鼠完整心臟直接凍在-80°冰箱了，沒(méi)有分離梗死區(qū)和非梗死區(qū)�，F(xiàn)在下一步要做蛋白質(zhì)組學(xué)，整個(gè)完整心臟勻漿不太現(xiàn)實(shí)，因?yàn)楣Ｋ绤^(qū)面積相對(duì)于非梗死區(qū)要少很多，可能關(guān)鍵蛋白信號(hào)會(huì)淹沒(méi)，看文獻(xiàn)說(shuō)要提前分開(kāi)梗死區(qū)組織的，我們什么都沒(méi)有分離，取完整個(gè)心臟就凍在冰箱里了，解凍估計(jì)也看不清了吧？要怎么辦才好呢，希望有知道的蟲(chóng)友提提寶貴意見(jiàn)~多謝了�。�！ 1. 肉眼上怎么剝離梗死區(qū)，尤其是冰凍后的組織，有人說(shuō)用激光顯微切割，有的說(shuō)肉眼可觀察。。。。。解凍了分離對(duì)結(jié)果有很大影響吧？ 2.有做過(guò)心梗蛋白質(zhì)組學(xué)的嘛？一般是取得哪部分組織提取蛋白的？對(duì)照用的什么？ 3.是誰(shuí)不是右心室直接扔掉不用了？ 4.沒(méi)有用液氮速凍再轉(zhuǎn)存-80°，是不是對(duì)組織有影響呢？ 問(wèn)題較多，希望大家隨便說(shuō)，我廣泛接受意見(jiàn)~謝謝，謝謝啦~ |
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3樓2012-09-09 15:58:11
cpuyao
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2樓2012-07-31 15:39:07
lele_go
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【答案】應(yīng)助回帖
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cpuyao: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝，染色后的組織貌似不能做蛋白質(zhì)組了吧。。。。 2012-09-20 16:56:19
cpuyao: 金幣+20, ★★★很有幫助, 謝謝，染色后的組織貌似不能做蛋白質(zhì)組了吧。。。。 2012-09-20 16:56:19
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1、應(yīng)該是要染色進(jìn)行區(qū)分的，根據(jù)梗死區(qū)和非梗死區(qū)的顏色不同進(jìn)行區(qū)分。 2、做蛋白組學(xué)的時(shí)候用的是左心室的組織，對(duì)照組（取決于你的實(shí)驗(yàn)安排），一般是假手術(shù)組，就是只是進(jìn)行開(kāi)胸但是不接扎的組。當(dāng)然也可以直接用正常的心臟。 3、右心室要看你的實(shí)驗(yàn)需求，要是進(jìn)行切片觀察的話(huà)，還是建議你保留下來(lái)，畢竟完整的心臟的圖片才有說(shuō)服力。 4、如果是做分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)，我們一般是直接放到液氮里保存，但是如果是做病例切片染色的話(huà)，還要用氯化鉀來(lái)處理一下，保持心臟維持在舒張的狀態(tài)，這樣切片會(huì)比較好看！ 都是自己的一點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)，希望能對(duì)你有所幫助！ |
4樓2012-09-20 13:50:51
lele_go
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5樓2012-09-20 22:12:53
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