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dragonflydan金蟲 (初入文壇)
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[求助]
MTT法檢測(cè)生物學(xué)活性注意點(diǎn)，按照2010藥典3部做的，就是不成功啊
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| MTT法檢測(cè)生物學(xué)活性有哪些注意點(diǎn)，按照2010藥典3部做的，就是不成功啊 |
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conanzzz
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| 不成功的現(xiàn)象結(jié)果是怎樣的? |
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2樓2012-08-02 09:36:45
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| 你想檢測(cè)什么？MTT法的原理是通過檢測(cè)活細(xì)胞內(nèi)線粒體琥珀酸脫氫酶來進(jìn)行細(xì)胞檢測(cè)，這種方法的漏洞在于若是你的活性蛋白有可能是通過增加或者減少活細(xì)胞內(nèi)的琥珀酸脫氫酶的數(shù)量或者活性并沒有增加或者減少細(xì)胞的總體水平也會(huì)出現(xiàn)意想不到的結(jié)果 |
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3樓2012-08-02 11:40:26
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| MTT避光，加DMSO前，把液體吸干凈，不能有細(xì)菌污染等，都會(huì)影響OD值 |
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4樓2012-08-02 12:27:13
dragonflydan
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5樓2012-08-02 16:28:21
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白介素-2的活性， A每孔加50μl基礎(chǔ)培養(yǎng)基，空白對(duì)照加100μl基礎(chǔ)培養(yǎng)基。 B 加標(biāo)準(zhǔn)品或供試品溶液： 第一排加50μl 200IU的標(biāo)準(zhǔn)品或供試品，然后依次稀釋取50μl加到下孔內(nèi)，第七排吸出50μl棄掉，第八排不加IL-2。 C 細(xì)胞懸液制成5×105/ml，加基礎(chǔ)培養(yǎng)基，混勻，每孔加細(xì)胞50μl，第8排做陰性對(duì)照。放入5%二氧化碳培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)24h D 將MTT用0.22μm濾膜過濾后，然后每孔加MTT 10μl，37℃ 5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4-6h E 每孔加10%SDS 100μl，37℃ 5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h。在570nm處測(cè)吸光度 我這樣做有什么不對(duì)嗎，就是不出想要的結(jié)果 |
6樓2012-08-02 16:36:11
dragonflydan
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7樓2012-08-02 16:40:43
conanzzz
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shijunyu0618
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9樓2012-08-03 10:16:25
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10樓2012-08-03 10:30:33
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