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dragonflydan金蟲 (初入文壇)
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[求助]
MTT法檢測生物學活性注意點，按照2010藥典3部做的，就是不成功啊
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| MTT法檢測生物學活性有哪些注意點，按照2010藥典3部做的，就是不成功啊 |
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conanzzz
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| 不成功的現(xiàn)象結果是怎樣的? |
2樓2012-08-02 09:36:45
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| 你想檢測什么？MTT法的原理是通過檢測活細胞內(nèi)線粒體琥珀酸脫氫酶來進行細胞檢測，這種方法的漏洞在于若是你的活性蛋白有可能是通過增加或者減少活細胞內(nèi)的琥珀酸脫氫酶的數(shù)量或者活性并沒有增加或者減少細胞的總體水平也會出現(xiàn)意想不到的結果 |
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3樓2012-08-02 11:40:26
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| MTT避光，加DMSO前，把液體吸干凈，不能有細菌污染等，都會影響OD值 |
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4樓2012-08-02 12:27:13
dragonflydan
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5樓2012-08-02 16:28:21
dragonflydan
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白介素-2的活性， A每孔加50μl基礎培養(yǎng)基，空白對照加100μl基礎培養(yǎng)基。 B 加標準品或供試品溶液： 第一排加50μl 200IU的標準品或供試品，然后依次稀釋取50μl加到下孔內(nèi)，第七排吸出50μl棄掉，第八排不加IL-2。 C 細胞懸液制成5×105/ml，加基礎培養(yǎng)基，混勻，每孔加細胞50μl，第8排做陰性對照。放入5%二氧化碳培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)24h D 將MTT用0.22μm濾膜過濾后，然后每孔加MTT 10μl，37℃ 5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4-6h E 每孔加10%SDS 100μl，37℃ 5%二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h。在570nm處測吸光度 我這樣做有什么不對嗎，就是不出想要的結果 |
6樓2012-08-02 16:36:11
dragonflydan
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7樓2012-08-02 16:40:43
conanzzz
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8樓2012-08-02 23:04:16
shijunyu0618
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9樓2012-08-03 10:16:25
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