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dhmdddd木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
SDS-PAGE蛋白膠咨詢
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一個(gè)蛋白膠讓實(shí)驗(yàn)室的人都崩潰了……樣品攢了N多，蛋白膠做了一周還是沒(méi)有做好……先說(shuō)下配置蛋白膠的試劑吧，AC濃度是30%，這個(gè)是買(mǎi)的，分離膠和濃縮膠的TRIS-HCL，10%SDS，都是新配置的。之前膠是凝的比較慢，可能是因?yàn)槲覀兊倪^(guò)硫酸銨受潮了，影響，然后我們每次都是加大過(guò)硫酸銨和TEMED的添加量，膠還好，能跑。最近一周做膠就是下午做好膠，放在水里，第二天就會(huì)變成圖片中的樣子……里面白色是顆粒狀的東西，像鹽粒，分離膠應(yīng)該是有一定的硬度，比較脆一點(diǎn)，可是這樣的分離膠出來(lái)很軟，和濃縮膠有點(diǎn)像，甚至比濃縮膠更軟……大家說(shuō)這個(gè)只是因?yàn)檫^(guò)硫酸銨的問(wèn)題嗎？之前也是用的這個(gè)過(guò)硫酸銨，添加量加倍的話是可以的，怎么現(xiàn)在會(huì)是這個(gè)樣子？請(qǐng)給位高手指教，謝謝~~ 白色的東西就是像鹽粒一樣的東西 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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APS現(xiàn)配現(xiàn)用最好，或者一次配置分裝保存于-20度備用。 膠現(xiàn)配現(xiàn)用。TEMED和APS就按照標(biāo)準(zhǔn)量加即可，稍微多一點(diǎn)也是可以的，太多容易造成燒膠。 如果找不到原因，最好的辦法就是把所有的試劑全部換新的，這樣是最快的解決問(wèn)題的辦法，我們?cè)瓉?lái)也遇到過(guò)類(lèi)似問(wèn)題，找了很長(zhǎng)時(shí)間幾乎所有試劑都換找原因，其實(shí)還不如一次解決，全新的就OK了。 |
4樓2012-08-03 11:09:36
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6樓2012-08-03 11:35:00
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7樓2012-08-03 11:36:39
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8樓2012-08-03 12:25:40
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10樓2012-10-18 23:21:42
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