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happyhehe新蟲 (初入文壇)
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[求助]
酶反應(yīng)
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| 現(xiàn)在在做酶反應(yīng)水解皂苷,但是一直沒找到合適的酶以及酶的水解條件,請(qǐng)問:在篩選酶的過程中,正確的流程是怎樣的?是先確定水解條件還是酶?很矛盾。有沒有關(guān)沒酶篩選的大體流程呢?最近做這個(gè)實(shí)驗(yàn)非常糾結(jié),望高手指點(diǎn),謝謝。 |
木蟲 (著名寫手)
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看篩選的目的,一般先出酶活,再考慮條件,這個(gè)時(shí)候一般用中性pH,不添加重金屬離子,但可以加Na,Mg;如果酶容易得,可直接以一定的條件來篩選,但是不要太多,可以先考慮pH,其次是耐受底物抑制,就是底物濃度稍高一些,如果知道是催化哪種反應(yīng)的,可考慮提高產(chǎn)物,看耐受產(chǎn)物抑制的程度。 如果是直接買各種商品酶來試驗(yàn),可考慮先用比較經(jīng)濟(jì)的條件統(tǒng)一試,或者以各種酶的最優(yōu)反應(yīng)條件分別試,找到最好的酶再進(jìn)一步優(yōu)化,再做固定化之類的研究。 |

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