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happyhehe

新蟲 (初入文壇)

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[求助] 酶反應(yīng)

現(xiàn)在在做酶反應(yīng)水解皂苷，但是一直沒找到合適的酶以及酶的水解條件，請(qǐng)問：在篩選酶的過程中，正確的流程是怎樣的？是先確定水解條件還是酶？很矛盾。有沒有關(guān)沒酶篩選的大體流程呢？最近做這個(gè)實(shí)驗(yàn)非常糾結(jié)，望高手指點(diǎn)，謝謝��！

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1樓 2012-08-06 14:45:44

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木蟲 (著名寫手)

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
happyhehe: 金幣+5, 博學(xué)EPI+1, ★★★很有幫助 2012-08-08 16:46:05

看篩選的目的，一般先出酶活，再考慮條件，這個(gè)時(shí)候一般用中性pH，不添加重金屬離子，但可以加Na,Mg；如果酶容易得，可直接以一定的條件來篩選，但是不要太多，可以先考慮pH，其次是耐受底物抑制，就是底物濃度稍高一些，如果知道是催化哪種反應(yīng)的，可考慮提高產(chǎn)物，看耐受產(chǎn)物抑制的程度。
如果是直接買各種商品酶來試驗(yàn)，可考慮先用比較經(jīng)濟(jì)的條件統(tǒng)一試，或者以各種酶的最優(yōu)反應(yīng)條件分別試，找到最好的酶再進(jìn)一步優(yōu)化，再做固定化之類的研究。

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2樓2012-08-07 10:33:49