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xgxofdream

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7樓: Originally posted by wangyanqing110 at 2012-08-09 13:21:12
AFM制樣很簡單，超過100nm的顆粒用AFM觀察有點難，一般看個石墨烯或者碳納米管還是可以的

這是原始文獻(xiàn)中用來表征這種顆粒的AFM方法：
The sample of dsDNA or ssDNA (10 μl) was deposited onto a freshly cleaved mica surface (Ted
Pella, Inc.) and left to adsorb for 10 min. Then 10 mM MOPS (12.5 mM Mg2+) (500 μl) was
added to the liquid cell and the sample was scanned in a tapping mode using Agilent AFM
series 5500 (Agilent Technologies, USA) with 0.08 N/m force constant cantilever of a Silicon
nitride cantilevers with sharpened Pyramidal tip (OMCL-TR400PSA, Olympus, Atomic Force
F&E GmbH, Mannheim, Germany). After engagement the tapping amplitude set point was
typically 2.0 volts and the scan rates ranged from 1-2 Hz. During the liquid AFM imaging the
better imaging was in most cases obtained with minimal loading forces applied and optimized
feedback parameters. Several AFM images, all 512 × 512 pixels, were obtained from separate
locations across the mica surfaces to ensure reproducibility of the results. All the images were
analyzed by using Gwyddion 2.16 software.

我看了，貌似沒什么制樣過程。你們幫我研究一下，難度在哪里？我打算請公司或者高校的人幫我做。

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學(xué)習(xí)雷鋒，好榜樣，忠于人民忠于黨

11樓2012-08-09 15:37:10

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xgxofdream

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5樓: Originally posted by zygoal at 2012-08-09 11:53:50
液體的AFM表征，我自己沒做過。隔壁實驗室做Bio-AFM，見過1-2次。
目前的SPM設(shè)備不少都帶著個液相測試的附屬功能
但是如何把圖做漂亮很花時間和精力
你要找得到愿意給你做的人，你就去做吧。

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學(xué)習(xí)雷鋒，好榜樣，忠于人民忠于黨

12樓2012-08-09 15:37:22

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zygoal

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
xgxofdream: 金幣+10, ★★★很有幫助, 多謝～ 2012-08-09 17:39:39

引用回帖:

12樓: Originally posted by xgxofdream at 2012-08-09 15:37:22
這是原始文獻(xiàn)中用來表征這種顆粒的AFM方法：
The sample of dsDNA or ssDNA (10 μl) was deposited onto a freshly cleaved mica surface (Ted
Pella, Inc.) and left to adsorb for 10 min. Then 10 mM MOPS ( ...

肯定能做的，找到專門做Bio-SPM的便可以了，對他們來說這也不算太難。文獻(xiàn)提供的測試參數(shù)可供參考，因為樣品不同需要個別具體來調(diào)試。
此外，能保證納米顆粒分散均勻，尤其是在液體表面有分布，就不需要特殊制樣。

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13樓2012-08-09 16:45:47

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江山無棱

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

引用回帖:

9樓: Originally posted by xgxofdream at 2012-08-09 15:30:42
5 nM左右，就只要知道個大慨尺寸就可以了。主要是證明這個顆粒合成了。...

想知道大概尺寸的話，用粒度儀可以測，zetasizer nano系列，直接測溶液而且用量少（大概1ml即可）速度快很快出結(jié)果，但有一個缺點就是它利用動態(tài)光散射，統(tǒng)計結(jié)果，有一定誤差。證明有顆粒應(yīng)該沒問題

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14樓2012-08-09 19:18:30

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xgxofdream: 金幣+10 2012-08-09 22:22:03

AFM現(xiàn)在很多都有液相功能，我手頭的AFM就有，但是相對的測量比較麻煩。分辨率上也有一定影響。而且，液相測量是讓樣品粒子在液體里沉積附著在基底上，這樣測量基底表面就能分辨出附著的樣品粒子。你的樣品穩(wěn)定期短，顆粒很小5nm，這個真的比較難做。

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我有我道，堅持本心。

15樓2012-08-09 21:29:38

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xgxofdream: 金幣+10 2012-08-09 22:22:08

可以，我看過我們學(xué)校AFM的說明書。里面寫了可以做溶液內(nèi)生物樣品的表征，配有專門的凹槽裝樣品，你的那個納米顆粒應(yīng)該也可以測。

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16樓2012-08-09 21:56:47

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敢問，一般像在高校，用AFM做我這種要求的試驗，對外收費是多少？

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17樓2012-08-09 22:22:59

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【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

11樓: Originally posted by xgxofdream at 2012-08-09 16:37:10
這是原始文獻(xiàn)中用來表征這種顆粒的AFM方法：
The sample of dsDNA or ssDNA (10 μl) was deposited onto a freshly cleaved mica surface (Ted
Pella, Inc.) and left to adsorb for 10 min. Then 10 mM MOPS ( ...

參數(shù)沒什么難度，完全可以做

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當(dāng)你總是緬懷過去的時候，證明你現(xiàn)在過的并不好！

18樓2012-08-09 22:24:33

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敢問，一般像在高校，用AFM做我這種要求的試驗，對外收費是多少？

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19樓2012-08-09 22:31:28

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xgxofdream: 金幣+30, ★★★★★最佳答案, 果斷30分送出。請問散射方法也是指的是AFM吧 2012-08-10 00:43:11

引用回帖:

10樓: Originally posted by xgxofdream at 2012-08-09 15:36:48
這是原始文獻(xiàn)中用來表征這種顆粒的AFM方法：
The sample of dsDNA or ssDNA (10 μl) was deposited onto a freshly cleaved mica surface (Ted
Pella, Inc.) and left to adsorb for 10 min. Then 10 mM MOPS ( ...

1）AFM 分析的是表面形貌。它不能直接看到溶液里懸浮的顆粒，只能“摸”出固定在基板表面的顆粒。你引用的這段文獻(xiàn)中，就提到了，“l(fā)eft to adsorb for 10 min”就是要讓樣品分子吸附在基板上。而對于你的樣品，需要多長時間靜置吸附，這個條件需要試。如果是5nm的球形顆粒很有可能是超過10分鐘的，甚至是不可能的。當(dāng)然也與粒子和基板的荷電和極性有關(guān)。

2）懸浮顆粒沉降吸附到基板的時間與粒徑可能存在一定關(guān)系，一般說來，大顆粒會穩(wěn)定得快，小顆粒相對較慢。那么，如果你的顆粒粒徑不均勻，在特定時刻，基板上吸附的粒子的粒徑分布會與實際溶液中粒子的粒徑分布差別很大。很可能得情況是，大量的大粒徑粒子，或者是雜質(zhì)已經(jīng)布滿了基板，而你想看的5nm粒子還沒有足夠地出現(xiàn)。

如果你不關(guān)心粒徑分布，只要證明有5nm的粒子，那么可以試試。但是要盡可能的除去大粒徑的粒子和雜質(zhì)，例如多次過濾。

3）前面說到了吸附的時間，你引的文獻(xiàn)中是10分鐘。文獻(xiàn)中還提到了掃描參數(shù)， 512 pixel， 1-2 Hz，算下來掃一張圖是4.3至8.6分鐘。考慮到你要看到5nm的粒子，要實現(xiàn)這個分辨率，4至8分鐘一張圖已經(jīng)很勉強(qiáng)了。再加上儀器操作調(diào)試的時間，即使一個非常熟練的操作者，在儀器性能和狀態(tài)極好的條件下，最樂觀的估算，也很難在20分鐘內(nèi)完成從一張圖（從進(jìn)樣開始計時）。再考慮到你的樣品吸附時間可能需要更長，你的粒子能穩(wěn)定到圖像掃出來么？

甚至，如果你的粒子吸附不那么牢靠的話，很有可能就被AFM的針尖推走了。

4）如果你確實想試試，建議一，處理基板，調(diào)節(jié)表面荷電性，甚至改變?nèi)軇�，目的是增�?qiáng)樣品粒子在基板的吸附能力；二，用質(zhì)量較好的針頭過濾器，多次過濾溶液，除去大粒子和雜質(zhì)；三，找個熟練工，找個好儀器、好針尖。

5）再次建議用散射方法。前面已經(jīng)有人提到了，原理上，動態(tài)光散射能給出溶液中1納米以下至微米級的粒徑分布。不過最好找個懂散射的人做，不然光有那么臺儀器，給出的數(shù)據(jù)不一定靠譜，解釋起來更是容易出錯。

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20樓2012-08-10 00:12:25

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