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雨簾靜思鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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關(guān)于如何除去破碎的酵母細(xì)胞壁的問(wèn)題?
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| 對(duì)于酵母細(xì)胞,產(chǎn)生子囊孢子后想破碎細(xì)胞壁得到其中的子囊孢子,現(xiàn)有困惑請(qǐng)教各位蟲(chóng)友,破碎后如何除去其中的雜質(zhì)(細(xì)胞壁,細(xì)胞器等)得到比較純凈的子囊孢子?ps:做過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)離心不可以。 |
銀蟲(chóng) (初入文壇)
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酶解法屬于化學(xué)方法,物理方法應(yīng)該是超聲之類的,不需要使用化學(xué)或生物試劑的。 破碎技術(shù)中細(xì)胞破碎法包括 機(jī)械法和非機(jī)械法.機(jī)械法又包括高壓勻漿、高速珠磨、超聲波破碎等方法。非機(jī)械法包括化學(xué)法、酶解法、滲透壓沖擊法、凍結(jié)融化法、干燥法。細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和破碎方法都會(huì)對(duì)細(xì)胞破碎產(chǎn)生影響。了接細(xì)胞壁的組成對(duì)于選擇破碎方法非常重要。在微生物中各種生物的細(xì)胞雖小但是每一種都有其特有的組成方式。例如:細(xì)菌球菌直徑0.5-1um桿菌直徑0.5-1um ,長(zhǎng)為直徑1-幾倍螺旋菌直徑03-1um,長(zhǎng)1-50um 細(xì)菌大小也不是一成不變的細(xì)胞重量10-13-10-12g ,每g細(xì)菌基本結(jié)構(gòu)是細(xì)胞不變部分,每個(gè)細(xì)胞都有,如細(xì)胞壁、膜、核。特殊結(jié)構(gòu)是細(xì)胞可變部分,不是每個(gè)都有,如鞭毛、莢膜、芽孢。革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌細(xì)胞壁的主要組成也是不同的,因而對(duì)細(xì)胞破碎的影響也不一樣革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁主要由肽聚糖層(約20-80nm)組成 ,而革蘭氏陰性菌肽聚糖層較薄,僅2-3nm,在肽聚糖層外還有兩層外壁層。外壁層約8-10nm,所以革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁較厚,較難破碎。對(duì)于霉菌來(lái)說(shuō) 霉菌的細(xì)胞壁較厚,約100-250nm。酵母菌酵母的細(xì)胞壁比革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁厚,更難破碎。 |
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