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雨簾靜思鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于如何除去破碎的酵母細胞壁的問題?
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| 對于酵母細胞,產(chǎn)生子囊孢子后想破碎細胞壁得到其中的子囊孢子,現(xiàn)有困惑請教各位蟲友,破碎后如何除去其中的雜質(zhì)(細胞壁,細胞器等)得到比較純凈的子囊孢子?ps:做過相關(guān)實驗離心不可以。 |
銀蟲 (初入文壇)
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酶解法屬于化學(xué)方法,物理方法應(yīng)該是超聲之類的,不需要使用化學(xué)或生物試劑的。 破碎技術(shù)中細胞破碎法包括 機械法和非機械法.機械法又包括高壓勻漿、高速珠磨、超聲波破碎等方法。非機械法包括化學(xué)法、酶解法、滲透壓沖擊法、凍結(jié)融化法、干燥法。細胞壁的結(jié)構(gòu)和破碎方法都會對細胞破碎產(chǎn)生影響。了接細胞壁的組成對于選擇破碎方法非常重要。在微生物中各種生物的細胞雖小但是每一種都有其特有的組成方式。例如:細菌球菌直徑0.5-1um桿菌直徑0.5-1um ,長為直徑1-幾倍螺旋菌直徑03-1um,長1-50um 細菌大小也不是一成不變的細胞重量10-13-10-12g ,每g細菌基本結(jié)構(gòu)是細胞不變部分,每個細胞都有,如細胞壁、膜、核。特殊結(jié)構(gòu)是細胞可變部分,不是每個都有,如鞭毛、莢膜、芽孢。革蘭氏陽性菌和陰性菌細胞壁的主要組成也是不同的,因而對細胞破碎的影響也不一樣革蘭氏陽性菌的細胞壁主要由肽聚糖層(約20-80nm)組成 ,而革蘭氏陰性菌肽聚糖層較薄,僅2-3nm,在肽聚糖層外還有兩層外壁層。外壁層約8-10nm,所以革蘭氏陽性菌細胞壁較厚,較難破碎。對于霉菌來說 霉菌的細胞壁較厚,約100-250nm。酵母菌酵母的細胞壁比革蘭氏陽性菌的細胞壁厚,更難破碎。 |
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