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丙二醛MDA的測定問題
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丙二醛MDA測定找到兩種方法但不知道哪種合適，請高手給看看： 第一種： （一）試劑配制 20%TCA：100g 三氯乙酸 → 500mL 0.67%TBA：3.35g硫代巴比妥酸 → 500ml 20%TCA （避光） (二)丙二醛比活力的測定 0.5ml酶液（對照用0.5ml的0.05mol/L pH=7.8的磷酸緩沖液代替酶液）+ 3mlTBA―振蕩―沸水浴上反應(yīng)30min―冷卻（至少30min）離心（10000rpm,10min）―比色（OD600、OD532、OD450）。 第二種： 1、試劑配制： 10%TCA：100g 三氯乙酸 → 1L 0.67%TBA：3.35g硫代巴比妥酸 → 500ml 10%TCA （避光） 2、測定步驟: 0.2 樣品+1.6ml 10%TCA 研磨→12000g 離心 10min →上清1.5ml +1.5 0.67% TBA →沸水煮30min →冷卻，離心→上清OD450，OD532，OD600 這兩種方法基本一樣，但區(qū)別就在于樣品需不需要加TCA來研磨？如果不需要加TCA這樣測定所用的酶液和測SOD、CAT的一樣了可以省下不少時間，如果需要加入TCA研磨來制酶液就要全部重新研磨很費(fèi)時間，請高手給說說樣品到底需不需要加TCA研磨？為什么？ |
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