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consist10金蟲 (正式寫手)
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[求助]
急求 多謝 關(guān)于大腸桿菌菌體總蛋白的提取
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親們，偶有問題請教大家，麻煩支招啊，現(xiàn)在快急死了。 我想從未轉(zhuǎn)化任何載體的大腸桿菌中提取菌體總蛋白，但搖菌的時候是不是就是沒有氨芐，卡納等抗性了呢？沒有抗性的話是不是容易有雜菌產(chǎn)生？搖菌的溫度應(yīng)還是37度的吧？另外，如果我用轉(zhuǎn)化了表達(dá)載體的大腸桿菌提取菌體總蛋白，是不是不進(jìn)行目的基因的誘導(dǎo)表達(dá)就可以了，因為此時目的基因還是核酸，未表達(dá)為蛋白，提取的菌體總蛋白就還是大腸桿菌的總蛋白，這么理解對嗎？親們，煩請支招啊，有金幣酬謝大家。 |
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dshlove
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
consist10: 金幣+5 2012-08-17 11:24:12
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵應(yīng)助 2012-08-17 14:09:12
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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵應(yīng)助 2012-08-17 14:09:12
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給點建議。 你做未轉(zhuǎn)化蛋白的提取，建議選取本身帶抗性的感受態(tài)，或者菌種，加上抗生素。這樣可以避免雜菌蛋白的干擾。 如果你轉(zhuǎn)化了，我的建議是誘導(dǎo)。因為你想得到總蛋白，所以你要將能表達(dá)蛋白的基因都用上，不能閑置某種能表達(dá)蛋白的基因，即使是需要誘導(dǎo)的。 |
2樓2012-08-17 10:05:35
consist10
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3樓2012-08-17 11:14:11
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4樓2012-08-17 12:14:57
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