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[交流] 單抗純化方法

本人是生物制品公司的，現(xiàn)在單抗做到制備小鼠腹水，準(zhǔn)備純化，大家都是用什么方法純化呢？因?yàn)槲覀兪且a(chǎn)的，所以成本不能太高。

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1樓 2012-08-22 14:44:22

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myfinalway

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wizardfan: 金幣+1, 謝謝參與 2012-08-23 05:59:13

用工業(yè)純化柱

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2樓2012-08-22 19:37:47

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sxndliujing

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引用回帖:

2樓: Originally posted by myfinalway at 2012-08-22 19:37:47
用工業(yè)純化柱

工業(yè)柱就是柱層析嗎？那過(guò)柱子之后還要濃縮吧？

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3樓2012-08-23 08:23:15

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xj3661

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sxndliujing: 金幣+1, 謝謝！ 2012-08-23 09:49:52

以前在企業(yè)我們純抗體步驟是：澄清，超濾，DEAE層析柱、親和層析柱，這都是生產(chǎn)規(guī)模了(中試規(guī)模以上)，不知樓主能否用得上

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4樓2012-08-23 09:15:47

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sxndliujing

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引用回帖:

4樓: Originally posted by xj3661 at 2012-08-23 09:15:47
以前在企業(yè)我們純抗體步驟是：澄清，超濾，DEAE層析柱、親和層析柱，這都是生產(chǎn)規(guī)模了(中試規(guī)模以上)，不知樓主能否用得上

謝謝！超濾是不是就是過(guò)0.22的膜？親和層析柱是指protein A或protein G嗎？DEAE層析柱和親和層析柱只過(guò)一個(gè)行不行？
我的問(wèn)題有點(diǎn)多

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6樓2012-08-23 09:58:03

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eurekayan

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7樓2012-08-23 10:14:31

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xj3661

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wizardfan: 金幣+5, 謝謝參與，解釋得很詳細(xì) 2012-08-24 05:25:19
wizardfan: 回帖置頂 2012-08-24 05:25:26
sxndliujing: 金幣+3, 很詳細(xì)，謝謝！ 2012-08-24 13:02:24

在純化過(guò)程前面步驟的超濾一般是指超濾膜包，不同截留量的，我們常用的是10KD的；親和柱時(shí)是Protein A；關(guān)于DEAE和親和能不能只用一個(gè)的問(wèn)題呢，我們過(guò)DEAE的目的主要是讓它吸附細(xì)胞上清中酚紅等雜質(zhì)，所以純化的效果不明顯，而親和的特異性很高，純化的效果好！而且我們的親和柱子都非常脆弱，直接上細(xì)胞上清估計(jì)就掛了！

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8樓2012-08-23 20:02:48

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xiehe_ai

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sxndliujing: 金幣+1, 謝謝！ 2012-08-25 13:06:42

引用回帖:

6樓: Originally posted by sxndliujing at 2012-08-23 09:58:03
謝謝！超濾是不是就是過(guò)0.22的膜？親和層析柱是指protein A或protein G嗎？DEAE層析柱和親和層析柱只過(guò)一個(gè)行不行？
我的問(wèn)題有點(diǎn)多

...

0.22μm的是微濾，超濾一般是1nm~20nm。較少大于20nm的
抗體分子量一般在150KD左右，理論上小于這個(gè)數(shù)值的超濾膜都可，但由于膜孔徑的不均一性，還是適當(dāng)小點(diǎn)好。

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9樓2012-08-25 11:32:58

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biopharmedu

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參考GE 抗體純化手冊(cè)

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10樓2012-08-28 09:31:09

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簡(jiǎn)單回復(fù)

8531974865樓

2012-08-23 09:26 回復(fù)

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