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413558306金蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于LD50測定
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| 本人是學有機合成的，對于藥理不是很懂，最近在做一個化合物的LD50，小鼠給藥是進行腹腔注射，0.2mg/Kg, 這個化合物現(xiàn)象很奇怪，做預試實驗時，450mg/kg時，四只小鼠死亡兩只。340mg/kg四只小鼠死亡一只。289mg/kg四只小鼠都未死亡。然后做正試實驗時，289mg/kg這個計量的小鼠死亡三只，其他計量小鼠全死亡。藥品是昨天下午配制，今天下午做的實驗。以前也做過這個化合物的正式實驗，找的最大致死量為380mg/kg，最小致死量為260mg/kg,結(jié)果小鼠在380mg/kg只死亡三只，其他計量幾乎都只死亡一只。我覺得很奇怪，找不到原因，望大牛指教一二。非常感謝！ |
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不是很明白你的意思,但是總體而言就是LD50值漂移。LD50數(shù)值本身就是一個范圍，不是具體的值，我們做實驗的時候，得出的是一個具體的數(shù)值，那時因為我們每次作實驗的時候客觀條件是唯一固定的，所以得出一個固定的LD50值。如果你每次實驗的的LD50值都完全相同，那么只有一個可能,你在造假,這是毫無疑問的。 看了你給的數(shù)據(jù)，個人感覺如果不是必要，你完全可以不必檢測LD50了，因為檢測LD50的目的就是找出對動物致死的劑量，你都找出最小致死量了，就沒有必要要LD50了，最小致死量的價值遠高于LD50。LD50這個方法在國外早就不使用了，在國內(nèi)用的也不多了。 如果你還是確定要檢測LD50，那么我個人有幾個建議供你參考！ 1 化學品批號一定要一致 2 動物性別、體重范圍一定要和預實驗盡量保持一致 3 動物飼養(yǎng)環(huán)境要合格，普通區(qū)溫度19--26度，濕度40%-70%，SPF級區(qū)溫度20--25度，濕度40-70%。 4 分組劑量要適當，LD50一般至少要分為4個組，理想的是最低劑量無動物死亡，最高劑量動物100%死亡，中間的組別個別死亡，但是有劑量依賴關(guān)系。下面是做LD50實驗的方法和要點，希望對比有幫助！ 祝實驗成功！ 試驗動物：選用小鼠或大鼠。小鼠體重18～22 g，同次試驗體重相差不超過4 g；大鼠體重120～150 g，同次試驗體重相差不超過20 g，雌雄各半。試驗前禁食12 h～16 h。 預試驗 取少量動物，分成3～6組，每組4～10只動物，雌雄各半。一般先配制最大濃度藥物，然后按等比關(guān)系（如 2:1）配制成多個劑量，按估計劑量給藥，如果全死則降低劑量，如果全活則增加劑量，進而確定出Dm和Dn，并記錄死亡數(shù)。 正式試驗 1 確定組數(shù)、計算各組劑量： 組數(shù)（G）：5～8組； 各組劑量：各組劑量要按等比級數(shù)排列，按公式求出公比r。 r是Dm/Dn的值,再開G-1方所得 按公比求各組劑量：D1，D2，D3，D4，D5，……，Dm 其中D1=Dn= 最小劑量，D2=D1• r，D3 =D2• r，……Dm =Dn-1•r 2 給藥后觀察：給藥后連續(xù)觀察4 h，記錄動物中毒發(fā)生時間、持續(xù)時間和恢復時間、各組動物的死亡數(shù)量、死亡時間。給藥后至少連續(xù)觀察14 d，觀察動物的一般體征狀態(tài)。 3 根據(jù)結(jié)果，計算LD50 |
7樓2012-08-26 09:56:44
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