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zjt829木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
蛋白電泳結(jié)果幫忙分析
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SDS-page電泳跑出的結(jié)果如下，請(qǐng)大家?guī)兔Ψ治鲆幌略虬�，謝了~ 蛋白：植物組織蛋白提取液（用tris-HCl的方法提的，然后直接與上樣緩沖液混合之后上樣） 最左邊marker：170KD-10KD 請(qǐng)分析 12%分離膠+6%濃縮膠 |
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zjt829
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5樓2012-08-24 11:02:29
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【答案】應(yīng)助回帖
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zjt829: 金幣+5, ★有幫助, 多謝建議。提取的是總蛋白，跟對(duì)照看有毒物質(zhì)對(duì)蛋白的影響 2012-08-24 11:16:10
小丹木木: 金幣+2, 熱心的蟲(chóng)蟲(chóng) 2012-08-24 13:52:09
zjt829: 金幣+5, ★有幫助, 多謝建議。提取的是總蛋白，跟對(duì)照看有毒物質(zhì)對(duì)蛋白的影響 2012-08-24 11:16:10
小丹木木: 金幣+2, 熱心的蟲(chóng)蟲(chóng) 2012-08-24 13:52:09
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從膠上看，蛋白量是沒(méi)問(wèn)題的。 樣品處理中甘油影響不大，再說(shuō)沒(méi)甘油，樣品在膠孔沉不下去。植物組織蛋白我沒(méi)提取過(guò)，是不是先的把組織搗碎，用Tris-HCl去浸泡，之后離心取上清濃縮。 我覺(jué)得，你在離心之前要取點(diǎn)樣，1:1加上樣buffer，96度加熱個(gè)10-15分鐘，之后再離心，點(diǎn)樣時(shí)候只點(diǎn)上清部分的樣。同時(shí)將你10000rpm4度離心30min，濃縮后的樣品也加熱點(diǎn)樣，兩個(gè)樣做一下對(duì)比。 還有，不知道你跑膠是要看什么，總蛋白還是某種蛋白。還是你的蛋白分子量是超過(guò)170kd的。 |
6樓2012-08-24 11:13:23
dshlove
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7樓2012-08-24 11:22:08
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8樓2014-10-31 10:08:25
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