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maii鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
DNA提取
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最近在幫別人提桃的DNA，可是我試了幾乎所有ctab提取DNA的方法，都不湊效�，F(xiàn)在的問(wèn)題是用異丙醇沉淀DNA時(shí)，可見(jiàn)白色沉淀，但下一步用乙醇沉淀時(shí)，就成了果凍！我就用除多糖的方法去消除，可是根本不管用。有那位大俠做過(guò)相關(guān)的工作，指點(diǎn)一下迷津。謝謝了！ 原來(lái)在提DNA時(shí)的問(wèn)題解決了，現(xiàn)在又遇到了新的問(wèn)題。 我提的是桃的DNA，走的路線是用提取緩沖液先除一下細(xì)胞間的雜質(zhì)，后用CTAB裂解，再后是加氯仿-異戊醇，苯酚-氯仿-異戊醇，氯仿-異戊醇，再加1/10體積的NaAc，二倍體積的無(wú)水乙醇，得到沉淀，再用70%乙醇洗，到這都好著呢，在消化DNA時(shí)用的是氯仿-異戊醇，1/10體積的NaAc，二倍體積的無(wú)水乙醇，可到了這兒就又有點(diǎn)像果凍了，跑電泳顯示有雜質(zhì)，不知該怎么辦？ 我用的離心速度都是12000rpm,5min. [ Last edited by maii on 2007-6-4 at 08:35 ] |
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2樓2007-05-30 15:42:55
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5樓2007-05-30 21:33:16
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6樓2007-05-30 22:06:25
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7樓2007-05-30 22:20:27
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8樓2007-05-30 22:35:29
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謝謝各位蟲(chóng)友的回答。原來(lái)在提DNA時(shí)的問(wèn)題解決了，現(xiàn)在又遇到了新的問(wèn)題。 我提的是桃的DNA，走的路線是用提取緩沖液先除一下細(xì)胞間的雜質(zhì)，后用CTAB裂解，再后是加氯仿-異戊醇，苯酚-氯仿-異戊醇，氯仿-異戊醇，再加1/10體積的NaAc，二倍體積的無(wú)水乙醇，得到沉淀，再用70%乙醇洗，到這都好著呢，在消化DNA時(shí)用的是氯仿-異戊醇，1/10體積的NaAc，二倍體積的無(wú)水乙醇，可到了這兒就又有點(diǎn)像果凍了，跑電泳顯示有雜質(zhì)，不知該怎么辦？ 我用的離心速度都是12000rpm,5min. [ Last edited by maii on 2007-6-3 at 13:32 ] |
9樓2007-06-03 13:30:07
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10樓2007-06-03 19:17:03
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