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[交流]
DNA提取
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最近在幫別人提桃的DNA,可是我試了幾乎所有ctab提取DNA的方法,都不湊效。現在的問題是用異丙醇沉淀DNA時,可見白色沉淀,但下一步用乙醇沉淀時,就成了果凍!我就用除多糖的方法去消除,可是根本不管用。有那位大俠做過相關的工作,指點一下迷津。謝謝了! 原來在提DNA時的問題解決了,現在又遇到了新的問題。 我提的是桃的DNA,走的路線是用提取緩沖液先除一下細胞間的雜質,后用CTAB裂解,再后是加氯仿-異戊醇,苯酚-氯仿-異戊醇,氯仿-異戊醇,再加1/10體積的NaAc,二倍體積的無水乙醇,得到沉淀,再用70%乙醇洗,到這都好著呢,在消化DNA時用的是氯仿-異戊醇,1/10體積的NaAc,二倍體積的無水乙醇,可到了這兒就又有點像果凍了,跑電泳顯示有雜質,不知該怎么辦? 我用的離心速度都是12000rpm,5min. [ Last edited by maii on 2007-6-4 at 08:35 ] |

木蟲 (小有名氣)
櫻花騎士

木蟲 (正式寫手)
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謝謝各位蟲友的回答。原來在提DNA時的問題解決了,現在又遇到了新的問題。 我提的是桃的DNA,走的路線是用提取緩沖液先除一下細胞間的雜質,后用CTAB裂解,再后是加氯仿-異戊醇,苯酚-氯仿-異戊醇,氯仿-異戊醇,再加1/10體積的NaAc,二倍體積的無水乙醇,得到沉淀,再用70%乙醇洗,到這都好著呢,在消化DNA時用的是氯仿-異戊醇,1/10體積的NaAc,二倍體積的無水乙醇,可到了這兒就又有點像果凍了,跑電泳顯示有雜質,不知該怎么辦? 我用的離心速度都是12000rpm,5min. [ Last edited by maii on 2007-6-3 at 13:32 ] |
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