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關(guān)于用搖床振蕩培養(yǎng)時(shí)的幾個(gè)問題。
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首次用搖床振蕩培養(yǎng)一種真菌，有幾個(gè)問題想請(qǐng)教大家： 1、為什么文獻(xiàn)上都是搖7d呢，若有事耽擱了，多搖了幾天會(huì)有什么問題？ 2、接下來要做活性成分分析的話，不知道大家是哪種方法？看文獻(xiàn)有先抽濾，將菌絲和發(fā)酵液分離，然后分別濃縮、萃取、色譜之類的；還有的是將全部發(fā)酵的東西超聲破碎，然后離心取上清、濃縮等等�；蛘哌�有更好的方法？ 3、不知道大家那些參數(shù)（時(shí)間、溫度、轉(zhuǎn)速）是怎么確定的？ |
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1. 文獻(xiàn)中培養(yǎng)7天一般是具體培養(yǎng)條件下產(chǎn)量的平臺(tái)期，建議你在確定條件的情況下做一個(gè)動(dòng)態(tài)或者半動(dòng)態(tài)產(chǎn)量以及細(xì)胞量分析，找到對(duì)數(shù)期以及平臺(tái)期這樣你就知道哪天結(jié)束發(fā)酵最合適 2.活性成分分析方面，你首先要確定活性物質(zhì)是胞內(nèi)還是胞外，建議你分開，取樣之后離心將上清和細(xì)胞分別處理，上清用各種溶劑萃取，細(xì)胞超聲破碎或者低溫烘干后研磨后，溶劑萃取，初期做的話建議先簡(jiǎn)單萃取直接HPLC-MS來鑒定物質(zhì)，后期需要大量純品時(shí)在濃縮，柱子之類的分離�？梢钥聪嚓P(guān)文獻(xiàn)總結(jié)。 3.培養(yǎng)條件這個(gè)你可以采取單因素或者做一個(gè)PB設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單搞定 |
3樓2012-08-29 20:57:46
gezhijiang
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2樓2012-08-29 14:27:23
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4樓2012-08-29 22:50:43
hotchange
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不同菌種時(shí)間不同，可以每天去觀察一下，養(yǎng)長(zhǎng)了時(shí)間菌種形態(tài)可能會(huì)發(fā)生變化的 2查文獻(xiàn)如果可以確定峰值，跑跑液相 3單因素加正交，要耐心 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
5樓2012-08-29 23:17:27
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6樓2012-08-30 00:03:31
cheauyn
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| 搖7天是根據(jù)菌的生長(zhǎng)情況確定的，或者可以說7天的時(shí)候產(chǎn)物量最高。真如你說的有事耽擱了，那之前的七天就白做了。發(fā)酵結(jié)束后的處理方法是根據(jù)產(chǎn)物是屬于胞內(nèi)還是胞外確定的，你之前說的先抽濾再處理的是胞外產(chǎn)物。先細(xì)胞破碎再處理是測(cè)的胞內(nèi)產(chǎn)物。不是大家怎么做就怎么做的。培養(yǎng)條件要進(jìn)行條件優(yōu)化確定。也可根據(jù)文獻(xiàn)先有一個(gè)大概的培養(yǎng)條件。然后自己再進(jìn)行更進(jìn)一步的優(yōu)化。 |
7樓2012-08-30 10:59:18
8樓2012-08-30 16:29:17
愛莫若月
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9樓2012-08-30 18:14:33
10樓2012-08-31 14:09:04
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