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關(guān)于用搖床振蕩培養(yǎng)時的幾個問題。
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首次用搖床振蕩培養(yǎng)一種真菌,有幾個問題想請教大家: 1、為什么文獻(xiàn)上都是搖7d呢,若有事耽擱了,多搖了幾天會有什么問題? 2、接下來要做活性成分分析的話,不知道大家是哪種方法?看文獻(xiàn)有先抽濾,將菌絲和發(fā)酵液分離,然后分別濃縮、萃取、色譜之類的;還有的是將全部發(fā)酵的東西超聲破碎,然后離心取上清、濃縮等等;蛘哌有更好的方法? 3、不知道大家那些參數(shù)(時間、溫度、轉(zhuǎn)速)是怎么確定的? |
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1. 文獻(xiàn)中培養(yǎng)7天一般是具體培養(yǎng)條件下產(chǎn)量的平臺期,建議你在確定條件的情況下做一個動態(tài)或者半動態(tài)產(chǎn)量以及細(xì)胞量分析,找到對數(shù)期以及平臺期這樣你就知道哪天結(jié)束發(fā)酵最合適 2.活性成分分析方面,你首先要確定活性物質(zhì)是胞內(nèi)還是胞外,建議你分開,取樣之后離心將上清和細(xì)胞分別處理,上清用各種溶劑萃取,細(xì)胞超聲破碎或者低溫烘干后研磨后,溶劑萃取,初期做的話建議先簡單萃取直接HPLC-MS來鑒定物質(zhì),后期需要大量純品時在濃縮,柱子之類的分離?梢钥聪嚓P(guān)文獻(xiàn)總結(jié)。 3.培養(yǎng)條件這個你可以采取單因素或者做一個PB設(shè)計簡單搞定 |
木蟲 (正式寫手)
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金蟲 (小有名氣)
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