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[交流] RNA提取膠圖求大牛幫忙看看

小妹第一次提RNA
20120831-RNA.jpg 上樣3ul
8.31 rna又跑.jpg 上樣2ul
樣品相同
不懂為什么最上面的條帶跑出那么奇怪的帶型
請(qǐng)大牛幫忙分析：
1.從膠圖看，pr、DNA污染嚴(yán)重嗎？能做反轉(zhuǎn)么？
2.是不是我提的RNA太多了，所以拖尾成這樣？

在線等啊急急急

8.31 rna又跑.jpg

20120831-RNA.jpg

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1樓 2012-08-31 16:50:53

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xfliu

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RNA濃度太大了，點(diǎn)0.5ul就夠了。

質(zhì)量應(yīng)該還可以，做反轉(zhuǎn)應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題

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2樓2012-08-31 17:28:09

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ayaya007

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2樓: Originally posted by xfliu at 2012-08-31 17:28:09
RNA濃度太大了，點(diǎn)0.5ul就夠了。

質(zhì)量應(yīng)該還可以，做反轉(zhuǎn)應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題

請(qǐng)問(wèn) 這個(gè)點(diǎn)2 ul做反轉(zhuǎn)OK不？
我擔(dān)心有蛋白污染做反轉(zhuǎn)怕受影響啊

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3樓2012-08-31 17:52:07

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2樓: Originally posted by xfliu at 2012-08-31 17:28:09
RNA濃度太大了，點(diǎn)0.5ul就夠了。

質(zhì)量應(yīng)該還可以，做反轉(zhuǎn)應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題

好的~謝謝！

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4樓2012-08-31 18:10:18

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joan198108

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RNA質(zhì)量鑒定最好是電泳結(jié)果結(jié)合OD260/OD280結(jié)果考慮

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5樓2012-08-31 21:40:19

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constra

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這個(gè)明顯濃度太高了，質(zhì)量很不錯(cuò)啊，用膠定量不太準(zhǔn)確滴，怎么也得測(cè)個(gè)OD。不過(guò)我?guī)?shí)驗(yàn)的時(shí)候也就這樣目測(cè)來(lái)著�？茨阋鍪裁戳耍崔D(zhuǎn)的話也看你用什么樣的引物嘍

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6樓2012-08-31 22:00:18

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從圖上看，質(zhì)量還是不錯(cuò)的，如果你要做Micro RNA的話，可能還需要好一點(diǎn)，要是普通克隆的話，應(yīng)該沒(méi)什么大問(wèn)題。

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7樓2012-08-31 22:09:24

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jjg0912

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RNA提的還是不錯(cuò)的，點(diǎn)樣量太大，而且你最好用nanodrop測(cè)一下濃度，這樣心里有個(gè)譜。

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8樓2012-08-31 22:19:56

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8樓: Originally posted by jjg0912 at 2012-08-31 22:19:56
RNA提的還是不錯(cuò)的，點(diǎn)樣量太大，而且你最好用nanodrop測(cè)一下濃度，這樣心里有個(gè)譜。

謝謝！

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9樓2012-09-01 12:19:58

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7樓: Originally posted by sjjsy7 at 2012-08-31 22:09:24
從圖上看，質(zhì)量還是不錯(cuò)的，如果你要做Micro RNA的話，可能還需要好一點(diǎn)，要是普通克隆的話，應(yīng)該沒(méi)什么大問(wèn)題。

謝謝！

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10樓2012-09-01 12:20:15

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6樓: Originally posted by constra at 2012-08-31 22:00:18
這個(gè)明顯濃度太高了，質(zhì)量很不錯(cuò)啊，用膠定量不太準(zhǔn)確滴，怎么也得測(cè)個(gè)OD。不過(guò)我?guī)?shí)驗(yàn)的時(shí)候也就這樣目測(cè)來(lái)著�？茨阋鍪裁戳�，反轉(zhuǎn)的話也看你用什么樣的引物嘍

謝謝！

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11樓2012-09-01 12:20:23

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sl35537417

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有蛋白可以用酚氯仿異戊醇做一遍純化

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12樓2012-09-01 13:17:15

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baby1987

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這是什么的RNA這么亮，提的挺好的，就是電泳點(diǎn)樣的濃度太高了，還有最好用氯仿抽提兩次，可能會(huì)更好一些。

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13樓2012-09-01 13:37:56

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