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sjjsy7

銀蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] 膠回收老收不到，請(qǐng)教高手

本人新手，最近在構(gòu)載體，剛把基因都P出來(lái)，可酶切后老是收不到片段，各種方式都試過(guò)了還不行，現(xiàn)想問(wèn)一下做過(guò)的前輩，做膠回收要注意些什么？還有就是哪個(gè)公司的試劑盒回收效率高點(diǎn)，我用的是天跟的，不過(guò)都放2年多了，馬上要中期考核了，很著急，請(qǐng)各位高手幫忙�。�！

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1樓 2012-09-01 22:37:26

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mitocam

新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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1949stone: 金幣+1, 鼓勵(lì) 2012-09-17 17:23:15

限制酶有沒(méi)有被污染了？跑完膠有沒(méi)有看到正確的DNA帶？回收試劑可以放很久的，應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題。檢查一下膠融化后的pH值，回收液應(yīng)該是黃色的。

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3樓2012-09-02 04:09:23

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windleakey

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1949stone: 金幣+1, 鼓勵(lì) 2012-09-17 17:22:30

我也是新手，最近才做了兩次膠回收，用的omega的，也是放在那很久了的，我是用來(lái)做轉(zhuǎn)化的所以濃度得高點(diǎn)，我發(fā)現(xiàn)最后用無(wú)菌三蒸水洗脫時(shí)，把洗脫下來(lái)的液體再吸回到吸附柱里，再重復(fù)洗脫一次，濃度就比以前大不少，希望對(duì)你有幫助

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2樓2012-09-01 23:16:58

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qiaoxianying

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看一下溶膠液的PH值，把它調(diào)到原來(lái)的數(shù)值

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4樓2012-09-02 08:47:54

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xiaxuel

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膠回收應(yīng)該注意，跑膠的Buffer 為新的，也可能是試劑盒保質(zhì)期到了，建議換新的試劑盒！我用的是一款國(guó)產(chǎn)的試劑盒--karroten 效果很好！回收效率也很高，希望對(duì)你有所幫助！

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5樓2012-09-02 15:14:25

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