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tianjietian木蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助：雙歧桿菌的培養(yǎng)方法！
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| 實(shí)驗(yàn)室要擴(kuò)項(xiàng)，做雙歧桿菌的計(jì)數(shù)，以前沒有做過類似的實(shí)驗(yàn)，只知道雙歧桿菌是專性厭氧菌，想請教各位大拿，這個菌種的培養(yǎng)條件是什么?最好是從菌種傳代的培養(yǎng)基溫度等等條件到計(jì)數(shù)觀察菌落特征都能詳細(xì)提供一下！謝謝！著急��！ |
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tianjietian
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謝謝指導(dǎo)！那么凍干菌株在復(fù)活的時候用什么培養(yǎng)基？PYG、營養(yǎng)肉湯還是其他的？我在CICC購買的陽性菌株，使用說明上用強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基培養(yǎng)雙歧桿菌，不知道能不能培養(yǎng)出來？還有我們實(shí)驗(yàn)室目前沒買到PYG的添加試劑（氯化紅霉素和維生素K1），只有液體培養(yǎng)基，不知道不加的話菌能否生長？厭氧條件也都用了，就是平板劃線不長，您說的雙層平板法是否接完之后再鋪一層培養(yǎng)基啊？昨天剛把新買到的雙歧傳了肉湯和斜面，36度厭氧培養(yǎng)了，不知道結(jié)果如何，還請繼續(xù)指教！！ |
3樓2012-09-04 12:12:55
with_nothing
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我們養(yǎng)過，給你作參考：雙歧桿菌，培養(yǎng)基PTYG，TPY，MRS等。37度培養(yǎng)。要創(chuàng)造厭氧環(huán)境才能培養(yǎng)，我們采用厭氧箱法。液體培養(yǎng)條件要求稍微低一點(diǎn)，可用圓底燒瓶（口比較細(xì)，容量還大），塞上棉塞在普通培養(yǎng)箱中也可以生長，但平板幾乎不行，可以試試雙層平板法，如果不長，那就要必須創(chuàng)造嚴(yán)格的厭氧環(huán)境了。 計(jì)數(shù)時常采用傾注平板法，具體實(shí)驗(yàn)方法在實(shí)驗(yàn)書上都有。菌體會在培養(yǎng)基表面和中間都生長，長在表面和底部的是圓形，長在培養(yǎng)基中間的是菱形。 雙歧桿菌保藏可采用甘油管法，配60%的甘油溶液，與發(fā)酵液1:3混合，用EP管保藏于-80度冰箱即可，雙歧桿菌的平板在4度下死亡較快，兩天以后就夠嗆能接出來了。 |
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小崔9333
2樓2012-09-03 16:38:12
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