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zmj521good鐵桿木蟲 (小有名氣)
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[交流]
為什么沒有轉(zhuǎn)化成功的菌依然可以在Amp+培養(yǎng)基上長呢？到底為什么呢？ 已有10人參與
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| 我將連接好的T載體轉(zhuǎn)化感受態(tài)DH5α，之后用載體上的通用引物擴增，總是無帶，后來提取質(zhì)粒，發(fā)現(xiàn)竟沒有質(zhì)粒，所以說明轉(zhuǎn)化失敗，但是轉(zhuǎn)化失敗菌為什么可以在含有抗生素的培養(yǎng)基上長呢？在這里請教各位高手了�。。� |
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7樓2012-09-06 08:49:32
2樓2012-09-04 21:56:53
米蘭紅黑魂
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3樓2012-09-04 22:23:56
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵交流 2012-09-05 14:13:16
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵交流 2012-09-05 14:13:16
| 通常有兩種可能，一種是Amp失效，如上所說，另外一種也比較常見，就是感受態(tài)細胞污染。我們實驗室最近就是這樣的，明明挑單克隆做感受態(tài)，誰知道居然就有Amp抗性菌的污染，直接把沒轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞涂在Amp板子上一樣長。后來跟師兄師姐們請教，原來是正�，F(xiàn)象，大家都遇到過。避免的方法就是保存好你的Dh5a的菌種，不要從感受態(tài)劃板子再做感受態(tài)。如果是Amp失效，換新的Amp，或者從其他實驗室借一個板子試試。有的時候Amp容易失效，搖菌時間過長也會導(dǎo)致提不出質(zhì)粒。如果是感受態(tài)污染，就重新做吧 |
4樓2012-09-05 09:22:38
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