 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 39 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2928 | 回復(fù): 38 | |||
[交流]
提RNA提傷了
|
|||
|
提RNA都快成提RNA工人了，提的次數(shù)那是個多啊，可是都要提提傷了，為什么老降解，怎么提都降解，到底是怎么回事，如果說夏天是因為天氣熱，這個天氣怎么也會降解，是個什么情況？我把洗滌RNA的乙醇第一次配成70%，第二次配成73%左右了，不知道腦子怎么了，可能是抽了，老是配錯。不知道這些有沒有影響。這是我這兩天提的RNA圖，請大家看看我能不能往下做RACE，我實在沒辦法了，不知道 到底是個什么原因。今天測了下第一次提的OD值，兩個OD260/280和濃度分別是：1.99，785.7ng/ul;2.02,1314ng/ul.我覺得值還是蠻好的。我檢測RNA的時候上樣量是2ul。用的是普通的檢測DNA的器皿，不過新?lián)Q的電泳緩沖液。 2012-9-5-4.jpg 2012-9-6-2.jpg [ Last edited by yananhl on 2012-9-7 at 10:44 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有252人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 細(xì)菌RNA提取
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 提取RNA與做RT-PCR的問題
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 提取RNA電泳上樣量
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 俺提的RNA，大家?guī)兔Τ虺虬桑趺椿厥履?/a>
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 新手提RNA，請教幾個問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- Promega SV提RNA
已經(jīng)有10人回復(fù)
- RNA提取
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 提RNA時樣品取材的問題？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】RNA提取結(jié)果分析
已經(jīng)有42人回復(fù)
- RNA提取
已經(jīng)有31人回復(fù)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)海洋學(xué)院招調(diào)劑碩士研究生
+1/77
-
青島大學(xué)固態(tài)電池研究團(tuán)隊招收材料、化學(xué)、物理等方向博士研究生
+2/52
-
天津城建大學(xué)招收物理、化學(xué)或者生物調(diào)劑生一名，前往天津大學(xué)聯(lián)合培養(yǎng)
+1/38
-
煙臺大學(xué)精準(zhǔn)材料高等研究院26年材料方向研究生招生
+1/33
-
巴黎西岱大學(xué)（Université Paris Cité）Fayna MAMMERI 導(dǎo)師尋找CSC公派博士生
+1/22
-
同濟(jì)大學(xué)環(huán)境學(xué)院 肖倩特聘研究員課題組 招聘碩士/博士（長期有效）
+1/17
-
江西水利電力大學(xué)接收調(diào)劑08工學(xué)皆可
+1/14
-
Alicat 層流壓差質(zhì)量流量控制器在新型硅碳負(fù)極流化床的應(yīng)用- 艾里卡特（Alicat）
+3/13
-
雙一流湘潭大學(xué)化工學(xué)院招收化工、能源動力、工程熱物理相關(guān)研究生調(diào)劑
+1/12
-
【博士招生】天津理工大學(xué)國家杰青王鐵課題組招收2026年博士研究生
+1/9
-
南開大學(xué)陳樹琪教授研究團(tuán)隊招收2026級超構(gòu)材料方向博士研究生
+1/7
-
雙一流天津工業(yè)大學(xué)電信學(xué)院李鴻強(qiáng)教授招收2026年申請審核制博士
+1/5
-
教育部長江學(xué)者和創(chuàng)新團(tuán)隊發(fā)展計劃”入選團(tuán)隊招收 材料，化學(xué)與化工博士研究生
+1/5
-
武漢紡織大學(xué)招收碩士研究生調(diào)劑 （社牛最好）
+1/5
-
調(diào)劑 22408 340分
+1/4
-
寧波東方理工大學(xué)余鵬課題組2026年上海交大聯(lián)培博士生、博士后、科研助理招聘
+1/3
-
CD40L抗體如何調(diào)控免疫應(yīng)答？
+1/3
-
化學(xué)工程與技術(shù) 國家雙一流學(xué)科 211高校 國家重點(diǎn)實驗室 博士研究生
+1/2
-
福建師范大學(xué)環(huán)境與資源學(xué)院招收2026級碩士生
+1/1
-
溫州大學(xué)化材學(xué)院王娟課題組招生
+1/1
★ ★ ★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
yananhl: 金幣+1, 恩，好�？赡軐�(dǎo)致這種現(xiàn)象的原因很多吧，就是不知道哪步的原因。 2012-09-06 09:57:33
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵交流經(jīng)驗 2012-09-06 13:55:59
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
yananhl: 金幣+1, 恩，好�？赡軐�(dǎo)致這種現(xiàn)象的原因很多吧，就是不知道哪步的原因。 2012-09-06 09:57:33
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵交流經(jīng)驗 2012-09-06 13:55:59
| 研究生期間也提了幾百個，但是是植物RNA。當(dāng)時用的管以及槍頭都是Axygen的RNase free產(chǎn)品，試劑為TaKaRa的RNAiso，其余儀器以及試劑都是自己處理的。提取這么多次，絕大部分質(zhì)量不錯（電泳結(jié)合分光光度計測定OD260/OD280），個人感覺環(huán)境和操作都很重要。提RNA最好有個獨(dú)立的實驗室，是在沒條件，最好有塊獨(dú)立的RNA操作區(qū)；在操作上，操作者的手套口罩等以及實驗每步都要考慮如何操作能降低降解的幾率。 |
12樓2012-09-05 20:40:25
★ ★ ★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
yananhl: 金幣+1, 謝謝 2012-09-06 09:56:31
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵交流經(jīng)驗 2012-09-06 13:56:14
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
yananhl: 金幣+1, 謝謝 2012-09-06 09:56:31
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵交流經(jīng)驗 2012-09-06 13:56:14
|
之前提過好多次RNA 人的肝癌組織的，每次的質(zhì)量都挺好的，說說我的方法，首先要確保所用的移液器和槍頭是RNase-free的 最好買進(jìn)口的，提組織的時候研磨用的研缽和研缽棒要用DEPC水浸泡24h然后高壓滅菌，最后烘干，烘干的過程中要用錫箔紙包封好。在研磨前最好把研缽和缽棒放在冰箱中預(yù)冷。磨組織的時候要在冰上，并且研缽中要加入trizol和液氮，磨的時候要快。另外就是要戴好手套和口罩。還要注意不要讓大家在你身邊來回走動，在實驗過程中盡量不要對著試驗臺說話，提RNA的試驗臺要遠(yuǎn)離提質(zhì)粒的試驗臺。我覺得這些都注意了應(yīng)該就不會有什么問題了，希望對LZ會有幫助。 [ Last edited by angel_yy on 2012-9-5 at 20:56 ] |
13樓2012-09-05 20:54:46
18樓2012-09-06 13:42:57
2樓2012-09-05 16:51:19
3樓2012-09-05 16:53:43
4樓2012-09-05 17:06:35
5樓2012-09-05 17:52:44
6樓2012-09-05 17:59:49
7樓2012-09-05 19:07:49
8樓2012-09-05 19:44:39
9樓2012-09-05 19:52:27
10樓2012-09-05 19:52:55
11樓2012-09-05 20:21:36
14樓2012-09-05 21:15:32
15樓2012-09-05 22:01:13
16樓2012-09-06 00:29:23
17樓2012-09-06 09:10:56
19樓2012-09-06 16:17:42
20樓2012-09-06 19:15:41
21樓2012-09-06 19:51:59
22樓2012-09-06 20:02:22
23樓2012-09-06 20:48:41
24樓2012-09-06 20:59:05
25樓2012-09-07 09:43:09
26樓2012-09-07 09:47:45
27樓2012-09-07 10:05:52
28樓2012-09-07 10:14:42
29樓2012-09-07 11:05:50
★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-09-10 13:48:49
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-09-10 13:48:49
你好！我也還在提RNA，提的效果也不好啊~也糾結(jié)呢， 但看你的圖，條帶清晰，還有3條，我覺得你的提的量應(yīng)該很多��！就是降解了吧，因為你的5S帶很亮，說明25S和18S降解成5S了吧，所以前兩條帶比較模糊。 我覺得首先保證材料新鮮，其次你用氯仿去蛋白的那步看有沒有必要再重復(fù)一次 ，最后就是跑電泳，電泳槽之類的要處理干凈，不要跑太長時間，一般檢測的話跑個15分鐘左右也行了吧！ 祝你好運(yùn)，也祝我自己好運(yùn)！ |
30樓2012-09-07 12:00:32
31樓2012-09-07 12:19:53
32樓2012-09-07 12:37:47
33樓2012-09-07 12:43:44
34樓2012-09-07 16:52:42
35樓2012-09-09 20:46:40
36樓2012-09-10 10:44:25
37樓2012-09-10 17:57:44
38樓2012-09-10 19:09:03
39樓2012-09-11 19:48:14
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 yananhl 的主題更新
| 39 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +6 | 蛋黃咸肉粽 2026-03-26 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 材料cailiao 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
[考研] 化學(xué)工程085602 305分求調(diào)劑 +17 | RichLi_ 2026-03-25 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +7 | 匹克i 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 北科281學(xué)碩材料求調(diào)劑 +17 | tcxiaoxx 2026-03-20 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥292求調(diào)劑 +6 | 小小陳小小 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +8 | zhn03 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京郵電大學(xué) 288分 材料考研 求調(diào)劑 +3 | jl0720 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專業(yè)總分300求調(diào)劑 +5 | 曼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 打過很多競賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +6 | 藍(lán)山月 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求b區(qū)院校調(diào)劑 +4 | 周56 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +15 | Zhao anqi 2026-03-22 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 13853210211 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 080500求調(diào)劑 +3 | zzzzfan 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 344求調(diào)劑 +3 | desto 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境學(xué)碩288求調(diào)劑 +8 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 要好好無聊 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿深大，0703化學(xué)，總分302，求調(diào)劑 +4 | 七月-七七 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料 271求調(diào)劑 +5 | 展信悅_ 2026-03-21 | 5/250 |
|