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berthelot比色法測定發(fā)酵液中的γ-氨基丁酸,發(fā)酵液遇苯酚變渾濁 已有1人參與
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如題,測定標(biāo)樣時沒有問題,但是發(fā)酵液遇苯酚后變渾濁后面結(jié)果無法測定,怎么解決呢? 應(yīng)該是發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)等大分子變性,試過TCA除蛋白,先加苯酚沉淀離心,但是結(jié)果還是渾濁 |
專家顧問 (著名寫手)
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專家經(jīng)驗: +24 |
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1. 可以把苯酚的用量和時間 再 重新確定一下 2. 可以把發(fā)酵液用真空過濾網(wǎng)過濾過,相當(dāng)于再次提純一下,除掉一些小分子的雜質(zhì) 3. 去除蛋白后 也可以考慮過濾一下,小分子的就不要用了 4. 不知道你的實驗具體是如何操作的,但是,如果涉及到溫度的話,最好控制一下, 或者參考一下相關(guān)文獻(xiàn),改變你的溫度,以免蛋白變性 5. 還有就是把你用到的最初最初的原料很仔細(xì)的提純后再進(jìn)行下面一步的實驗,實驗過程中的每個試驗參數(shù)都要很仔細(xì)的去考量, 6. 離心的速度和時間要控制一下 7. 實驗過程中,要確保操作空間的無菌 只能想到這么多,希望對你能有幫助 |
專家顧問 (著名寫手)
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專家經(jīng)驗: +24 |
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我沒做過類似的實驗,但是我做過很多的別的方面的類似的實驗,所以,出現(xiàn)問題的時候,我會想到從這些方面著手去考慮,先解決幾個問題再說 做實驗時很費時間的,有的時候做了一兩個月,出來的結(jié)果還不盡如意 另外,可以建議你,你做實驗的時候,試驗周期如果比較長的話,你可以考慮平行做幾組實驗,這樣,其中一組如果不小心污染了,還有備份的 不知道你具體做的是什么,我以前做細(xì)胞培養(yǎng)和藥物緩釋的時候 是平行幾組做的,因為細(xì)胞的培養(yǎng)周期比較長,這樣,即使 期間有的被污染了,我還有備份,不用重頭來過 還有就是 你用的苯酚是生物實驗級用的嗎?這個最好不要用工業(yè)級,用純度高的實驗級的 祝好運 |
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