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berthelot比色法測(cè)定發(fā)酵液中的γ-氨基丁酸，發(fā)酵液遇苯酚變渾濁 已有1人參與
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如題，測(cè)定標(biāo)樣時(shí)沒有問題，但是發(fā)酵液遇苯酚后變渾濁后面結(jié)果無法測(cè)定，怎么解決呢？ 應(yīng)該是發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)等大分子變性，試過TCA除蛋白，先加苯酚沉淀離心，但是結(jié)果還是渾濁 |
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pipibaby
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【答案】應(yīng)助回帖
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我沒做過類似的實(shí)驗(yàn)，但是我做過很多的別的方面的類似的實(shí)驗(yàn)，所以，出現(xiàn)問題的時(shí)候，我會(huì)想到從這些方面著手去考慮，先解決幾個(gè)問題再說 做實(shí)驗(yàn)時(shí)很費(fèi)時(shí)間的，有的時(shí)候做了一兩個(gè)月，出來的結(jié)果還不盡如意 另外，可以建議你，你做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，試驗(yàn)周期如果比較長(zhǎng)的話，你可以考慮平行做幾組實(shí)驗(yàn)，這樣，其中一組如果不小心污染了，還有備份的 不知道你具體做的是什么，我以前做細(xì)胞培養(yǎng)和藥物緩釋的時(shí)候 是平行幾組做的，因?yàn)榧?xì)胞的培養(yǎng)周期比較長(zhǎng)，這樣，即使 期間有的被污染了，我還有備份，不用重頭來過 還有就是 你用的苯酚是生物實(shí)驗(yàn)級(jí)用的嗎？這個(gè)最好不要用工業(yè)級(jí)，用純度高的實(shí)驗(yàn)級(jí)的 祝好運(yùn) |
m6064樓2012-09-07 00:29:48
pipibaby
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
m606: 金幣+5, ★有幫助, 謝謝！ 2012-09-06 08:44:31
zhang8826857: MicEPI+1, good，lz反饋有幫助，而且回答的很用心，epi一枚 2012-09-08 10:04:14
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zhang8826857: MicEPI+1, good，lz反饋有幫助，而且回答的很用心，epi一枚 2012-09-08 10:04:14
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1. 可以把苯酚的用量和時(shí)間 再 重新確定一下 2. 可以把發(fā)酵液用真空過濾網(wǎng)過濾過，相當(dāng)于再次提純一下，除掉一些小分子的雜質(zhì) 3. 去除蛋白后 也可以考慮過濾一下，小分子的就不要用了 4. 不知道你的實(shí)驗(yàn)具體是如何操作的，但是，如果涉及到溫度的話，最好控制一下， 或者參考一下相關(guān)文獻(xiàn)，改變你的溫度，以免蛋白變性 5. 還有就是把你用到的最初最初的原料很仔細(xì)的提純后再進(jìn)行下面一步的實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過程中的每個(gè)試驗(yàn)參數(shù)都要很仔細(xì)的去考量， 6. 離心的速度和時(shí)間要控制一下 7. 實(shí)驗(yàn)過程中，要確保操作空間的無菌 只能想到這么多，希望對(duì)你能有幫助 |
2樓2012-09-06 00:35:41
3樓2012-09-06 08:49:30
5樓2012-09-07 12:21:52
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