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JosiniLH金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助：牛蒡子中酚類化合物的分離相關(guān)問題
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現(xiàn)需要做牛蒡子中酚類化合物的分離，由于是剛開始做，對(duì)什么都不太懂，所以有些關(guān)于硅膠柱的分離問題需要各位蟲友們幫忙解答，不勝感激！ 1.利用硅膠柱進(jìn)行分離，一般的樣品上樣量與硅膠的比例應(yīng)是多少，即硅膠載樣量應(yīng)怎么算？ 2.硅膠柱中的柱體積應(yīng)怎么算？是柱子的體積，還是硅膠所占的體積，或是其他什么體積？ 3.一般利用梯度洗脫，每個(gè)梯度洗幾個(gè)柱體積較為合適？ 4.對(duì)于酚類的分離，流動(dòng)相中有沒有必要加點(diǎn)酸或堿？若要加，是加酸呢，還是加堿？ 謝謝！ |
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2樓2012-09-06 09:51:12
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
JosiniLH: 金幣+3 2012-09-06 11:15:47
豆哥: 金幣+1, 謝謝 2012-09-06 13:18:28
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| 樣品的上樣量與硅膠的比例大概是1:6-8，拌樣硅膠的比例是1:1.5；柱體積是硅膠包括樣品在內(nèi)的所有上柱的體積；這換極性的過程和幾個(gè)柱體積沒多大德爾關(guān)系，看你樣品下來的程度如何，樣品下的快的話換的可以快些，反之則需要多過一段時(shí)間；酚類物質(zhì)偏酸性，可以加酸性抑制劑，不過看你的樣品而定，下來的比較好的話就不需要，不然溶劑不好回收并且處理的時(shí)候加的酸不好除去 |
3樓2012-09-06 10:01:44
JosiniLH
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4樓2012-09-06 11:15:24
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5樓2012-09-06 11:18:37
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6樓2012-09-06 11:31:45
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【答案】應(yīng)助回帖
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xiaoxiao270: 金幣+1, 3Q 2012-09-06 22:44:32
個(gè)人建議 樣品拌樣3倍左右 柱體積 大量粗分離的話60倍左右 細(xì)分的話可以增加倍數(shù) 但不超過100倍 這個(gè)倍數(shù)問題還得看情況 主要是柱子的高度足夠高 柱效才可以。 關(guān)于梯度洗脫 追求每個(gè)梯度洗幾個(gè)柱體積不是重點(diǎn) 關(guān)鍵是你出來東西分離效果咋樣 |
7樓2012-09-06 11:48:03
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【答案】應(yīng)助回帖
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豆哥: 金幣+1, 謝謝 2012-09-06 13:18:41
JosiniLH: 金幣+6, 謝謝！ 2012-09-06 22:29:02
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥: 金幣+1, 謝謝 2012-09-06 13:18:41
JosiniLH: 金幣+6, 謝謝！ 2012-09-06 22:29:02
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這個(gè)建議樓主先看看有關(guān)柱層析的相關(guān)文獻(xiàn)和書。先了解一下基本的原理和操作什么的。 1.一般硅膠量30---70倍于上樣量。有資料說難分的可以100倍量。 2.柱體積是硅膠的體積不是柱子體積，個(gè)人覺得柱體積沒必要計(jì)算，對(duì)于初次裝住子可以用量筒量10ml、50ml、100ml、150ml。。。。水倒進(jìn)層析柱，分別在液面處畫一記號(hào)，這樣就知道體積了 3.梯度洗脫以幾個(gè)柱床體積可以洗脫下你的目標(biāo)產(chǎn)物為準(zhǔn)，沒有規(guī)定必須有多少 4.酚類以前沒做過，你可以查查資料看看別人怎么說的。 祝樓主好運(yùn) |
8樓2012-09-06 12:58:28
氫化大雪
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9樓2012-09-06 13:00:26
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10樓2012-09-06 13:05:03
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