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luozhen2008木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
轉(zhuǎn)染后細(xì)胞污染
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向大家求教個(gè)問(wèn)題。 關(guān)于轉(zhuǎn)染的，我有一個(gè)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染了兩次都發(fā)生污染，第一次四瓶細(xì)胞，污染了三瓶，一起做轉(zhuǎn)染的另一組沒(méi)有發(fā)生污染。 第二次再轉(zhuǎn)，四瓶細(xì)胞都污染了，一起轉(zhuǎn)的另一質(zhì)粒沒(méi)有污染。 你說(shuō)這是質(zhì)粒問(wèn)題，還是其他問(wèn)題。 從來(lái)沒(méi)有發(fā)生過(guò)這等事。 以前質(zhì)粒在外面抽提的也沒(méi)有轉(zhuǎn)染后污染的。現(xiàn)在質(zhì)粒到了無(wú)水乙醇沉淀時(shí)都是在超凈臺(tái)里面操作的。 |
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luozhen2008(金幣+1): 謝謝參與
wizardfan: 金幣+2, 鼓勵(lì)發(fā)帖交流。娶到細(xì)菌：） 2012-09-08 05:23:46
luozhen2008(金幣+1): 謝謝參與
wizardfan: 金幣+2, 鼓勵(lì)發(fā)帖交流。娶到細(xì)菌：） 2012-09-08 05:23:46
| 可能原因是質(zhì)粒有輕微的污染，第一次污染的是因?yàn)槟闳拥臅r(shí)候取到了細(xì)菌，沒(méi)有污染是因?yàn)槟銢](méi)有娶到細(xì)菌，一開(kāi)始污染的比較少，所以會(huì)有概率問(wèn)題。后來(lái)放的時(shí)間久了，可能是細(xì)菌增殖了，所以第二次全部污染。雖然提取質(zhì)粒是用乙醇沉淀的，但是還會(huì)有個(gè)別細(xì)菌存活下來(lái)，這是個(gè)概率問(wèn)題的。我之前遇到過(guò)這種情況，可以試一下高速離心質(zhì)粒，然后取上面的轉(zhuǎn)染。菌體比較重，會(huì)沉在EP的底部。還有就是從新沉淀質(zhì)粒，但要考慮回收率 |
2樓2012-09-07 15:03:04
huguangdong
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3樓2012-09-07 17:00:18
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luozhen2008
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7樓2012-09-08 10:18:09
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yingying1588
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16樓2012-09-11 21:12:30
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zzhwcz01
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gcworm12樓
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1383612849613樓
2012-09-08 21:52
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wulabin18樓
2012-09-11 23:30
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