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zds2257鐵桿木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
WB問(wèn)題
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| 跪求各位大神，我剛開(kāi)始做WB，我的分子量是80KD是植物核蛋白，提的植物的總蛋白，5% +10%電泳5小時(shí)，maker還沒(méi)完全跑出濃縮膠，就一起進(jìn)行80V恒壓濕法轉(zhuǎn)PVDF0.22膜轉(zhuǎn)6個(gè)小時(shí)，轉(zhuǎn)完后染膠無(wú)條帶，轉(zhuǎn)完后是用的試劑盒，封閉，稀釋抗體，洗膜都是用試劑盒里的blocking buffer（5%脫脂奶粉PBST稀釋），封閉一個(gè)小時(shí)，洗都洗5次只是每次加的量不多，壓膜曝光2小時(shí)，結(jié)果背景很深看不到目的帶，maker只看到一條帶,求分析原因 |
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xiaoqi5992
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3樓2012-09-14 23:52:45
xiaoqi5992
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