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尚慕寒銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
瓊脂糖凝膠電泳時，只有泳道兩邊發(fā)亮，中間沒有條帶
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如圖，跑的是總RNA，在28S的地方，只有泳道兩側(cè)發(fā)亮，中間卻沒有條帶。 應(yīng)該不是降解的原因，因為之前質(zhì)粒酶切的時候也遇到過這種情況，我把中間沒有條帶的地方切下來純化之后，跑出來的條帶是很亮的，所以中間不亮的地方實際有東西，但沒有染上色。質(zhì)粒的圖不在手邊，如果需要的話我下次發(fā)上來。請高手指點下有可能是什么情況，萬分感謝。 |
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2012-09-12 22:02:10, 21.51 K
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junminh
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-09-13 14:35:56
尚慕寒: 回帖置頂 2012-09-15 08:45:15
尚慕寒: 金幣+10, ★★★★★最佳答案, 十分感謝，我把上樣量做了一個梯度，然后加大了EB的用量，結(jié)果跑的膠圖非常漂亮！感謝！ 2012-09-15 08:46:42
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| 提的RNA結(jié)果不錯了，造成這個的原因是：上樣量太多，核酸帶的是負(fù)電核，而染色劑如EB帶的是正電荷，電荷方向相反，如果樣本量太多，則后面的條帶容易出現(xiàn)這樣的狀況，解決辦法：減少上樣量。其它的都是正常的。 |
6樓2012-09-13 14:04:26
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