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linlishare新蟲(chóng) (初入文壇)
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用顯色法測(cè)定總黃酮含量時(shí)為啥不變色
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測(cè)茶油黃酮含量時(shí)加完硝酸鋁和氫氧化鈉后都不出現(xiàn)變紅的現(xiàn)象反而有乳白色現(xiàn)在,是為什么呀 實(shí)驗(yàn)藥品:正己烷、體積比3:2甲醇溶液、60%的乙醇溶液、5%Na2CO3溶液、 10%Al(NO3)3溶液、1mol/LNaOH溶液、30%乙醇溶液 樣品溶液的制備:稱(chēng)取1.000g油脂樣品,用5ml正己烷溶解樣品,振蕩搖勻,加入2ml甲醇溶液(體積比3:2),振蕩2min,取下層溶液,再加入甲醇溶液,重復(fù)上述操作3次,得到樣品溶液。 實(shí)驗(yàn)方法:采用NaNO2-Al(NO3)3比色測(cè)定法。 取3ml樣品溶液,用60%的乙醇溶液定容至5ml(參比液為5ml 60%乙醇溶液),搖勻,加入0.3ml 5%Na2CO3溶液,靜置5min,再加入0.3ml 10%Al(NO3)3溶液,搖勻靜置6min,加入4ml 1mol/LNaOH溶液和0.4ml 30%乙醇溶液定容至10ml,混勻靜置10min,在510nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。 |
| 硝酸鋁法測(cè)定黃酮的前提條件是溶液時(shí)是水溶液或者是與水互溶的溶劑,LZ你的樣品室油脂,而且還用到了正己烷。這些都是不與水互溶的,試劑一加進(jìn)去就會(huì)渾濁變?yōu)槿闈嵋,這樣的液體根本就不能用比色法測(cè)定。當(dāng)初我用乙酸乙酯提取食用菌黃酮測(cè)定時(shí)也遇到過(guò)這樣的問(wèn)題,經(jīng)過(guò)很多次實(shí)驗(yàn)改進(jìn),最后改為三氯化鋁法。當(dāng)時(shí)我參考的文獻(xiàn)是,顧芙琳.比色法測(cè)定荊芥中黃酮含量[J].齊魯藥事,2009,28(7):403-405. |
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