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linlishare新蟲 (初入文壇)
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[求助]
用顯色法測定總黃酮含量時為啥不變色
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測茶油黃酮含量時加完硝酸鋁和氫氧化鈉后都不出現(xiàn)變紅的現(xiàn)象反而有乳白色現(xiàn)在，是為什么呀 實(shí)驗(yàn)藥品：正己烷、體積比3:2甲醇溶液、60%的乙醇溶液、5%Na2CO3溶液、 10%Al（NO3）3溶液、1mol/LNaOH溶液、30%乙醇溶液 樣品溶液的制備：稱取1.000g油脂樣品，用5ml正己烷溶解樣品，振蕩搖勻，加入2ml甲醇溶液（體積比3:2），振蕩2min，取下層溶液，再加入甲醇溶液，重復(fù)上述操作3次，得到樣品溶液。 實(shí)驗(yàn)方法：采用NaNO2-Al(NO3)3比色測定法。 取3ml樣品溶液，用60%的乙醇溶液定容至5ml（參比液為5ml 60%乙醇溶液），搖勻，加入0.3ml 5%Na2CO3溶液，靜置5min，再加入0.3ml 10%Al（NO3）3溶液，搖勻靜置6min，加入4ml 1mol/LNaOH溶液和0.4ml 30%乙醇溶液定容至10ml，混勻靜置10min，在510nm波長下測定吸光度。 |
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2樓2012-10-17 13:33:18
【答案】應(yīng)助回帖
hsd3521: 應(yīng)助指數(shù)+1 2012-10-19 22:35:50
| 硝酸鋁法測定黃酮的前提條件是溶液時是水溶液或者是與水互溶的溶劑，LZ你的樣品室油脂，而且還用到了正己烷。這些都是不與水互溶的，試劑一加進(jìn)去就會渾濁變?yōu)槿闈嵋海@樣的液體根本就不能用比色法測定。當(dāng)初我用乙酸乙酯提取食用菌黃酮測定時也遇到過這樣的問題，經(jīng)過很多次實(shí)驗(yàn)改進(jìn)，最后改為三氯化鋁法。當(dāng)時我參考的文獻(xiàn)是，顧芙琳.比色法測定荊芥中黃酮含量[J].齊魯藥事，2009,28(7)：403-405. |
3樓2012-10-19 16:49:01
xdz1978
至尊木蟲 (文壇精英)
持之以恒！
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- 專業(yè): 中藥內(nèi)分泌及代謝藥理
4樓2012-10-19 20:43:55
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