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愛莫若月木蟲 (小有名氣)
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[求助]
關于柱層析,點板~
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本人小碩,近期在做一株生防細菌的活性物質(zhì)分離~遇到一些問題還望各位賜教啊~ 1.常說的點板,也就是點硅膠板的時候用的展開液和噴板的時候那個溶液,我看到不同的文獻和實驗室用的都不一樣,想問問這個是怎么確定的?不同的溶劑有什么區(qū)別?怎么才能把這個板做好呢? 2.看到很多文獻就是用不同的有機溶劑去萃取,想知道不同的溶劑里萃取的東西有什么區(qū)別呢?每一種大概能萃取到什么東西呢?比如乙酸乙酯,石油醚,正丁醇,萃取到的分別是什么呢?怎么才能把我的菌里面的東西都覆蓋萃取到呢? 3.關于硅膠柱,凝膠柱,反相柱這三個分別有什么功能呢?優(yōu)點和缺點是怎樣的?怎么配合才能起到比較好的作用呢?還有就是怎么上樣,制備樣品呢? 4.關于柱子,我看了一些資料,柱子的種類很多,一看就暈了~這個又該怎么選擇呢?不同的有啥區(qū)別呢? 5.如果這些想跟其他的手段聯(lián)用,該怎么弄呢?比如加上液質(zhì)聯(lián)用,HPLC等等 由于本人完全是個新手,老板安排了這部分內(nèi)容又不得不做,所以問題問的比較幼稚的還望見諒啊~不過我覺得對于一個初學者,可能很多人也會遇到這樣的問題,所以,如果有比較在行的朋友~還請多多指教啊~如有經(jīng)典的書籍或者文獻,能分享的那就最好了!小弟先謝謝各位了~ |
新蟲 (職業(yè)作家)
術中小生

木蟲 (小有名氣)
木蟲 (著名寫手)
| 關于薄層和柱層析我有一些資料,都是我自己收集整理的作為新手入門很有參考價值。你可以先看一下http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4921780 |

金蟲 (小有名氣)

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個人感覺你現(xiàn)在最該關心的就是你們實驗室用的是什么柱子。根據(jù)柱子的性質(zhì)再進一步確定下一步的展開劑得問題。比如說硅膠柱,屬于弱酸性的。我們一般有薄層色譜硅膠板,還有用硅膠粉自己裝的硅膠柱。做植化的還會有大孔樹脂的,等等。對于硅膠柱,我們用的展開劑都是正向的,極性小得物質(zhì)走的最快,極性大的物質(zhì)在后面最后出來。展開劑的比例也是需要自己一點點摸索的。根據(jù)薄層板Rf值的大小,來調(diào)節(jié)相應的展開劑比例。大柱子的展開劑極性一般比走薄層板的小1.5-2倍。 對于液質(zhì)聯(lián)用,我用的是反向展開劑。極性大的東西先出來,極性小的后面出來,可以根據(jù)物質(zhì)的出峰時間,以及所對應的M來判定你需要的物質(zhì)出來的順序。 不知道你是用哪一種類型的一起要來分離你的產(chǎn)物?傊械臇|西都需要你根據(jù)實際情況實際分析。 正如樓上所說,你問的這些東西其實很多書上都有 |


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