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愛莫若月木蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于柱層析，點(diǎn)板~
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本人小碩，近期在做一株生防細(xì)菌的活性物質(zhì)分離~遇到一些問題還望各位賜教啊~ 1.常說的點(diǎn)板，也就是點(diǎn)硅膠板的時(shí)候用的展開液和噴板的時(shí)候那個(gè)溶液，我看到不同的文獻(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室用的都不一樣，想問問這個(gè)是怎么確定的��？不同的溶劑有什么區(qū)別？怎么才能把這個(gè)板做好呢？ 2.看到很多文獻(xiàn)就是用不同的有機(jī)溶劑去萃取，想知道不同的溶劑里萃取的東西有什么區(qū)別呢？每一種大概能萃取到什么東西呢？比如乙酸乙酯，石油醚，正丁醇，萃取到的分別是什么呢？怎么才能把我的菌里面的東西都覆蓋萃取到呢？ 3.關(guān)于硅膠柱，凝膠柱，反相柱這三個(gè)分別有什么功能呢？優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是怎樣的？怎么配合才能起到比較好的作用呢？還有就是怎么上樣，制備樣品呢？ 4.關(guān)于柱子，我看了一些資料，柱子的種類很多，一看就暈了~這個(gè)又該怎么選擇呢？不同的有啥區(qū)別呢？ 5.如果這些想跟其他的手段聯(lián)用，該怎么弄呢？比如加上液質(zhì)聯(lián)用，HPLC等等 由于本人完全是個(gè)新手，老板安排了這部分內(nèi)容又不得不做，所以問題問的比較幼稚的還望見諒啊~不過我覺得對于一個(gè)初學(xué)者，可能很多人也會遇到這樣的問題，所以，如果有比較在行的朋友~還請多多指教啊~如有經(jīng)典的書籍或者文獻(xiàn)，能分享的那就最好了！小弟先謝謝各位了~ |
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karl2100: 金幣+1, 謝謝回帖！ 2014-01-12 01:37:39
karl2100: 金幣+1, 謝謝回帖！ 2014-01-12 01:37:39
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個(gè)人感覺你現(xiàn)在最該關(guān)心的就是你們實(shí)驗(yàn)室用的是什么柱子。根據(jù)柱子的性質(zhì)再進(jìn)一步確定下一步的展開劑得問題。比如說硅膠柱，屬于弱酸性的。我們一般有薄層色譜硅膠板，還有用硅膠粉自己裝的硅膠柱。做植化的還會有大孔樹脂的，等等。對于硅膠柱，我們用的展開劑都是正向的，極性小得物質(zhì)走的最快，極性大的物質(zhì)在后面最后出來。展開劑的比例也是需要自己一點(diǎn)點(diǎn)摸索的。根據(jù)薄層板Rf值的大小，來調(diào)節(jié)相應(yīng)的展開劑比例。大柱子的展開劑極性一般比走薄層板的小1.5-2倍。 對于液質(zhì)聯(lián)用，我用的是反向展開劑。極性大的東西先出來，極性小的后面出來，可以根據(jù)物質(zhì)的出峰時(shí)間，以及所對應(yīng)的M來判定你需要的物質(zhì)出來的順序。 不知道你是用哪一種類型的一起要來分離你的產(chǎn)物�？傊械臇|西都需要你根據(jù)實(shí)際情況實(shí)際分析。 正如樓上所說，你問的這些東西其實(shí)很多書上都有 |
7樓2014-01-11 18:58:58
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4樓2012-09-24 21:27:55
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