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nieyaru新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于western blot SDS電泳時(shí)溴芬蘭線彌散的問(wèn)題
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我剛做WB，是大鼠肝組織。電泳的時(shí)候發(fā)現(xiàn)在濃縮膠里面樣品壓的不是很直，重要的是不像marker壓的那樣細(xì)，而且跑著跑著就會(huì)有彌散的現(xiàn)象，樣品都跑跑到分離膠了但是marker還沒(méi)到；電泳條件是濃縮膠50V，分離膠80V；轉(zhuǎn)完我就用考染了一下膠， 發(fā)現(xiàn)我的泳道上半節(jié)還可以算清楚，下半截就不清晰了 而且連在一起，那位熟手有遇見(jiàn)這種狀況給指點(diǎn)下有可能是什么原因呢？是濃縮膠太長(zhǎng)了還是電泳時(shí)電壓太低了？或者是別的原因啊 psb.jpg在濃縮膠里 2.jpg分離膠里 |
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小豬豬de煩惱
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9樓2014-09-01 17:21:50
cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 通常會(huì)有一點(diǎn)點(diǎn)彌散，如果上樣量大的話樣品道也不會(huì)像marker的那么細(xì)。考染下面有問(wèn)題的話，可以檢查一下你的分離膠Tris緩沖液的pH。還有就是配膠的所有溶液配好后最好過(guò)濾。濃縮膠太長(zhǎng)不會(huì)造成擴(kuò)散，只能使樣品濃縮得更好。 |
2樓2012-09-29 09:08:24
blackrose8089
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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3樓2012-09-29 09:27:21
lidonghong
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4樓2012-09-29 16:05:31
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