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[求助]
制備型HPLC一次進(jìn)樣量多少合適
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| 現(xiàn)在用制備HPLC分離一樣品，以前沒(méi)接觸過(guò)，想請(qǐng)教一下大家：是不是進(jìn)樣量太大了不好呢？（這臺(tái)HPLC規(guī)定最大進(jìn)樣量是500微升。）一般一次進(jìn)樣量多少合適呢？ |
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wangfei.ac 
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2樓2012-10-02 20:08:43
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3樓2012-10-02 22:28:55
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4樓2012-10-03 07:54:18
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5樓2012-10-03 11:26:42
tianming887
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【答案】應(yīng)助回帖
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進(jìn)樣量和進(jìn)樣體積是兩個(gè)不同的概念。 條件還是要摸索，進(jìn)樣量是由分離度決定的。如果色譜峰分的很開(kāi)，比如隔開(kāi)5、6分鐘，那就不必在乎，進(jìn)樣量多大都沒(méi)問(wèn)題，假如挨得很近，有交叉，就要小心了，進(jìn)樣量大會(huì)影響分離度的。一般剛開(kāi)始是從小到大，自己摸索一下。 還有個(gè)問(wèn)題要小心，假如樣品是甲醇溶解的，進(jìn)樣體積大的話會(huì)嚴(yán)重干擾出峰時(shí)間和峰形，因?yàn)槿芙鈽悠返募状几蓴_了流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度，這一點(diǎn)如果不注意你會(huì)做的很郁悶。假如樣品是水溶解的就不存在這個(gè)問(wèn)題。 對(duì)于甲醇溶解的樣品，進(jìn)樣體積別超過(guò)每分鐘總流速的50分之一。 |
6樓2012-10-03 20:39:58
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7樓2012-10-04 16:02:18
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8樓2014-06-03 10:25:00
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