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蟲心開始銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
求TBA值的測定方法。。詳細(xì)點的哦
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| 如題,萬分感謝大俠們 |

鐵桿木蟲 (正式寫手)
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油脂TBA值的測定方法 1.原理 油脂受到光、熱、空氣中氧的作用,發(fā)生酸敗反應(yīng),分解出醛、酮之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種,它能與TBA(硫代巴比妥酸)作用生成粉紅色化合物,在532nm波長處有吸收高峰,利用此性質(zhì)即能測出丙二醛含量,從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。 2.試劑 (1) TBA水溶液:準(zhǔn)確稱取TBA0.288g溶于水中,并稀釋至100ml(如TBA不易溶解,可加熱至全溶澄清,然后稀釋至100ml),相當(dāng)于0.02M; (2)三氯乙酸混合液:準(zhǔn)確稱取三氯乙酸(分析純)7.5g及0.1gEDTA,用水溶解,稀釋至100ml; (3)氯仿(分析純); (4)丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取0.315g1,1,3,3-四乙氧基丙烷,溶解后稀釋至1000ml,此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100μg,置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml,稀釋至100ml,此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛10μg,備用。 3.操作步驟 (1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 準(zhǔn)確吸取每ml相當(dāng)于丙二醛10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中,加水至總體積為5ml,加入5mlTBA溶液,然后按樣品測定步驟進行,測得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 (2)樣品制備與檢測 準(zhǔn)確稱取均勻的豆油15g,置于100ml有蓋三角瓶內(nèi),加入25ml三氯乙酸混合液,振搖半小時(保持油脂融溶狀態(tài),如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖)用雙層濾紙過濾,除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。 準(zhǔn)確移取上述濾液10ml置于25ml比色管內(nèi),加入10mlTBA溶液,混勻,加塞,置于90℃水浴內(nèi)保溫40min,取出,冷卻1h,移入小試管內(nèi),離心5min,上清液傾入25ml納氏比色管中,加入5ml氯仿,搖勻,靜置,分層,吸出上清液于532nm波長處,用2cm比色皿比色(同時作空白試驗)。 4.計算 丙二醛含量(nmol/g)==(A532-A600)*V1*V*1.55*1/10*W*V2 A為吸光度;V1為反應(yīng)液總量(5m1);V為提取液總量(5ml);V2為反應(yīng)液中的提取液數(shù)量(2ml);W為樣品重量(0.5g);1.55×10-1為丙二醛的微摩爾吸光系數(shù)(在1升溶液中含有1µmol丙二醛時的吸光度)。 |
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