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蟲心開始銀蟲 (初入文壇)
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求TBA值的測定方法。。詳細(xì)點(diǎn)的哦
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xiaojun542
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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油脂TBA值的測定方法 1.原理 油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酮之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。 2.試劑 (1) TBA水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA0.288g溶于水中，并稀釋至100ml（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml），相當(dāng)于0.02M； (2)三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100ml； (3)氯仿（分析純）； (4)丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100μg，置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml，稀釋至100ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛10μg，備用。 3.操作步驟 （1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 準(zhǔn)確吸取每ml相當(dāng)于丙二醛10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積為5ml，加入5mlTBA溶液，然后按樣品測定步驟進(jìn)行，測得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 （2）樣品制備與檢測 準(zhǔn)確稱取均勻的豆油15g，置于100ml有蓋三角瓶內(nèi)，加入25ml三氯乙酸混合液，振搖半小時(shí)（保持油脂融溶狀態(tài)，如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）用雙層濾紙過濾，除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。 準(zhǔn)確移取上述濾液10ml置于25ml比色管內(nèi)，加入10mlTBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內(nèi)保溫40min，取出，冷卻1h，移入小試管內(nèi)，離心5min，上清液傾入25ml納氏比色管中，加入5ml氯仿，搖勻，靜置，分層，吸出上清液于532nm波長處，用2cm比色皿比色（同時(shí)作空白試驗(yàn)）。 4.計(jì)算 丙二醛含量（nmol/g）==（A532-A600）*V1*V*1.55*1/10*W*V2 A為吸光度；V1為反應(yīng)液總量(5m1)；V為提取液總量(5ml)；V2為反應(yīng)液中的提取液數(shù)量(2ml)；W為樣品重量(0.5g)；1.55×10-1為丙二醛的微摩爾吸光系數(shù)（在1升溶液中含有1µmol丙二醛時(shí)的吸光度）。 |
2樓2012-10-04 09:05:45
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